各位前辈，黑曲霉菌悬液浓度的测定，碟子全部都长满了，怎么处理？

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黑曲霉菌悬液浓度的测定，选10-4到10-6三个平行，六个碟子全部都长满了，可以数背面分支数吗？还是要重新设定梯度？

是不是跟洗脱有关系？当时洗脱是加了9ml含0.5%吐温的氯化钠蛋白胨溶液，细细刮了很多遍，这个操作有问题吗？

八档丶电风扇

六个碟都长满了，有两个可能：1、菌浓度过高，2、培养时间太长（黑曲霉计数培养30-35℃一般2-3天，20-25℃一般3-4天），

黑曲霉长满了，计数数背后分支是不行的，已经不准确了

在洗脱的时候刮多刮少都没问题的，主要是后面稀释步骤，稀释到你需要的浓度梯度就好了。

菌浓度过高的话继续稀释就好了，不过按照我们之前的经验，一般都是在10^4-10^5左右，不过我们在洗脱之后会用棉花过滤一次。

逸清草堂

没有记错的话，霉菌，是需要每天计数的，你这估计是直接培养到最后一天再去计数吧

tiantiancw

如果刮取多了，尤其是比平常操作多很多，那还是有问题的，可能要选取更高的稀释级；建议平时规范标准操作，一个铂金耳多少就是多少

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八档丶电风扇 发表于 2024-4-7 08:53
六个碟都长满了，有两个可能：1、菌浓度过高，2、培养时间太长（黑曲霉计数培养30-35℃一般2-3天，20-25℃ ...

感谢回答，洗脱之后我没有用棉花过滤，之后可以这么操作看看。培养时间的话，是20-25℃，第三天就长满了

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逸清草堂 发表于 2024-4-7 09:28
没有记错的话，霉菌，是需要每天计数的，你这估计是直接培养到最后一天再去计数吧

是的，第三天才看，如果每天计数的话，是取平均值吗？

461792311214185

tiantiancw 发表于 2024-4-7 16:53
如果刮取多了，尤其是比平常操作多很多，那还是有问题的，可能要选取更高的稀释级；建议平时规范标准操作， ...

好的，感谢

逸清草堂

461792311214185 发表于 2024-4-7 21:07
是的，第三天才看，如果每天计数的话，是取平均值吗？

不是取平均值

墨鱼丸rpk

八档丶电风扇 发表于 2024-4-7 08:53
六个碟都长满了，有两个可能：1、菌浓度过高，2、培养时间太长（黑曲霉计数培养30-35℃一般2-3天，20-25℃ ...

一支黑曲霉斜面加多少洗脱液呢

八档丶电风扇

墨鱼丸rpk 发表于 2024-5-13 15:11
一支黑曲霉斜面加多少洗脱液呢

洗脱液这个看个人操作的、每个公司加的量都不一定相同，只要做一个稀释后浓度确认，按照确认后的稀释倍数来稀释就好了，比如我们的是小试管（15ml小试管）加5ml洗脱液，大试管（80ml）加10ml洗脱液，然后稀释到10^5，取0.1ml计数