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本帖最后由 静夜思雨 于 2013-7-3 10:37 编辑
41.生化检查用的鉴定盒是否需要跟培养基一样做适用性检查？如果需要做，应该如何进行？ 答：用阳性菌做一次，实验结果相符即可。 42.铜绿假单胞菌用什么方法保存及更活处理方法？ 答：建议采用甘油冻存管（终浓度为20%的甘油冻存管），-30℃（或更低温度）保存。 43.工作菌种每代可保存多长时间（斜面低温保藏法）才传下一代？ 答：教科书上的保存时间为1-6个月。 44.工作菌株的使用记录（时间、用途、使用者等）是否需要建立台账？ 答：是 45.菌株的纯度和特性要多久确认一次，最短时间和最长时间分别是多少？ 答：做标准储备菌株之前务必要进行鉴定，其它根据实际情况：如污染、活性下降、储存条件发上改变等。 46.革兰氏染色前，菌落是否要先纯化（接到营养琼脂斜面上）还是直接从选择性培养基上挑起菌落直接染色？ 答：要纯化，从选择性培养基挑取单个菌落，最好先接到营养琼脂斜面后，再进行染色。 47.真菌接至改良马丁液体培养基中，培养时间为多长？（白色念珠菌、黑曲霉）答：见2010版药典。 48.菌种鉴定一定要做到生化鉴定吗？ 答：要。可以选择传统的生化试验鉴定，也可选择鉴定仪或鉴定试剂条。请视自身情况而定。 49.是否可按10版药典中抑制控制菌检验判定方法进行？比如金葡菌做甘露醇平板分离，革兰染色，血浆凝固酶为阳性就可以了。 答：金葡这样做可以。其他菌株视具体情况而选择适宜的鉴定试验。 50.请介绍一下，有什么简便的方法灭菌甘油？ 答：高压湿热灭菌法 51.黑曲霉孢子悬液贮存期验证怎么做。‘ 答：请参考前面该问题的答复。 52.铜绿假单胞菌琼脂斜面变红，是否会造成菌种变异？如何避免该情况出现？（本菌株于25℃保存） 答：出现这样的情况建议对菌种纯度进行鉴定。实验操作请注意防止污染。 53.铜绿假单胞菌菌悬液是否也可在2~8℃保存，24小时内使用？ 答：不建议，请自己验证。 54.是否一定要使用CMCC的菌株吗？ 答：药典是这样规定的。 55.假如使用ATCC的菌株代替CMCC的可以吗？ 答：请按药典规定来进行实验，若是药品检验，请用CMCC菌株。 56.可以用液氮保藏甘油冷冻管吗？可以的话应该怎么操作？ 答：可以。具体操作不清楚。我们没有液氮保存罐。 57.贵所有开展支原体检查法这个实验吗？ 答：没有 58.制备菌悬液的时候，培养物用的营养肉汤用量是多少？ 答：没有具体规定，请自行制定。 59.制备菌悬液的时候怎样保证他是50cfu呢？具体说一下操作方法 答：自行摸索一套方法，固定下来，以后就按该方法做就可以了。 60.请问菌种斜面最好多长时间转接一次？ 答：参考上一题。 61.20%甘油v∕v是用水还是用相应培养基做稀释？ 答：用相应的培养基。 62.验证或做培养基的适用性检查时，若实际操作制得的菌悬液，经测定计数后不在规定的范围内，如＞100cfu，是否应判本次实验无效，应重试？若试菌，真菌生长较慢，不能短期内预算菌数，如何解决？ 答：第一个问题，请重试。第二个问题，请注意积累平时实验经验，标准化操作，慢慢摸索稀释的倍数。 63.有时候酵母菌在玫瑰红钠平板上不易观察，是否可用孟加拉琼脂培养基代替来作培养？ 答：药品检验请严格按药典规定，若是平时科研，应该可以用孟加拉红琼脂培养基代替。 64.菌种的每一次传代（如3代→4代→5代）都必须做菌种鉴定实验吗？ 答：视具体情况而定。 65.如何控制菌液的浓度为50～100cfu/ml？ 答：见前面问题的回复。 66.菌种的传代，营养肉汤或改良马丁0.5ml～0.8ml复苏冻干菌粉→直接涂布于营养琼脂培养基或改良马丁琼脂培养箱→是第一代还是第二代？ 答：冻干菌粉为第0代，若冻干菌粉未经过培养，直接涂布到培养基上，为第1代。 67.请教一个有关微生物限度检查的问题，在制备10～100cfu菌液时除了你说的比浊法，比较普遍的就是平板计数法，而其中用到的六种试验菌，细菌用营养琼脂计数，霉菌用玫瑰红钠琼脂平板计数，其它四种菌应用何种培养基计数？ 答：不知道此处所说的其他4种指的是什么菌。 68.只用平板计数，结果准确吗？还有没有其他方法制备10～100cfu菌悬液？答：这是一个很好的课题，若感兴趣，你们可以好好研究一下。 69.大肠埃希菌检查中，MUG培养基配制后显荧光是什么原因？ 答：有可能试管玻璃材质自发荧光，也可能清洗不干净，或培养基本身质量，比如有无发生污染等。 70.请问可用何种培养基或手段鉴定枯草芽孢杆菌？eg：大肠埃希菌用EMB，金黄色葡萄球菌用甘露醇 答：目前尚未有合适的选择性培养来鉴定枯草芽孢杆菌，可选用API 或细菌鉴定仪等手段来鉴定。 71.请问：细菌鉴定仪有哪些用途？能够鉴定沙门菌属下的各种沙门菌么？怎样应用？ 答：如有需要，可联系梅里埃的技术支持人员：13503006367 霍工。他会详细解答你想问的问题。 72.黑曲霉菌在2~8℃保存经验证后能否延长使用时间？ 答：药典规定在验证过的期限内使用。 73菌种的保藏可否用液体石蜡保藏？与甘油冷冻保藏有何区别？ 答：药典未记载液体石蜡保藏法，部分参考书记载斜面保藏法或半固定保藏法可加灭菌石蜡覆盖。 74.药典规定只能传代五次，此次实验结果是否有效？ 答：有效 75.三糖铁斜面穿刺会断层，这是为什么？ 答：产气菌产气使培养基断层，或培养基本身质量问题。
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发表于 2013-7-3 10:36:25
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