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薄层色谱制作方法规程
1.方法原理
薄层色谱是一种微量分析的分离过程,它将样品点在以玻璃板或铝、塑料等片材为载体的多孔 吸附剂薄层的固定相上,利用流动相在特定的展开室中将混合物中的组份推移到不同距离处,在色谱展开整个过程中,样品的成份受到正反不同的力的作用。
(1)流动相利用毛细管力带着样品穿过固定相。
(2)样品与固定相的相互作用是指组份在移行过程中由于偶极-(诱导)-偶极相互作用, 氢键和范德华力的作用而产生不同程度的延缓、吸附、分散、离子交换和络合等分离机理。
由于样品组份与流动相和固定相之间的相互作用力程度不同,整个毛细管流动过程中分离运动都在进行。基于这点,TLC系统(流动相和固定相)必须与样品很好地匹配。
用显色试剂处理,许多组份可在日光或紫外灯光下检视。色谱可用肉眼或使用光密度计和照相机记录或影像系统方法来评价。
目 录
1.方法原理............................................................................................... 3
2. 薄层板.......................................................................................................... 3
2.1 手工自制板........................................................................................ 3
2.1.1 玻璃板的要求............................................................................. 3
2.1.2 制作方法................................................................................. 3
2.2 商品化供应的预制板和高效板............................................................. 3
2.2.1 板的尺寸..................................................................................... 3
2.2.3 TLC/HPTLC 板的预洗及活化............................................................. 3
3.样品点样............................................................................................................. 3
3.1 点状点样和条带状点样.............................................................................. 3
3.2 样品点样位置..................................................................................... 4
4.层析................................................................................................................. 4
4.1 展开室............................................................................................ 5
4.2 溶剂............................................................................................... 5
4.3 展开室状况................................................................................................ 5
4.3.1 方法 A(展开室不饱和)................................................................. 5
4.3.2 方法B(部分饱和,无滤纸)............................................................... 6
4.3.3 方法C(展开室饱和,有滤纸)........................................................... 6
4.3.4 方法D展开室饱和,薄层预稳定)................................................ 7
4.4 参数........................................................................................... 8
4.4.1 温度................................................................................ 8
4.4.2 空气湿度..................................................................................... 8
5.层析后衍生作用.................................................................................. 8
5.1喷雾............................................................................................ 8
5.2浸渍.................................................................................... 8
6.检测.............................................................................................................. 8
6.1定性分析(同一性试验)............................................................... 8
6.2定量分析........................................................................................... 9
7.标准条件................................................................................................... 9
7.1 HPTLC板..................................................................................... 9
7.2 TLC板....................................................................................... 10
7.3.薄层色谱(TLC)的使用指南........................................................ 10
8.显色试剂............................................................................... 13
8.l.通用显色剂........................................................................... 13
8.2.专属性显色剂................................................................ 14
9、药物TLC实践技术............................................................................. 22
9.1 目的:.............................................................................................. 22
9.2 CMC-Na溶液的配制:........................................................... 23
9.3玻板:.......................................................................................... 24
9.4 研磨:................................................................................................... 24
9.5 铺板:.............................................................................................. 24
9.6 晾干:...................................................................... 25
9.7 活化:........................................................................................................ 26
9.8 点样:................................................................................ 26
9.9平衡与饱和:....................................................................................... 26
9.10 展开:............................................................................................ 27
9.11 显色:.............................................................................................. 27
9.12 问题与应用:.............................................................................................. 28
10、中药成分薄层分析方法集..................................................................................... 28
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