内毒素咨询

六钱

想请问，计算细菌内毒素的稀释倍数时，一定要按照最大有效稀释倍数进行稀释吗？如果不按照最大有效稀释倍数进行稀释，要如何判断应该将供试品稀释多少倍呢？是要通过干扰实验一步步进行吗？

teska

稀释倍数不能超过MVD，不是必须按照MVD进行稀释

鬼使神差

细菌内毒素检查中，不一定要按最大有效稀释倍数稀释，以下是具体判断供试品稀释倍数的方法：

干扰实验的必要性

干扰实验是关键步骤。因供试品常含干扰内毒素检测的成分，只有通过干扰实验，才能准确判断供试品在何稀释倍数下对检测无干扰，进而确定合适的稀释倍数，所以一般需先进行干扰实验。

干扰实验的步骤

预实验：先初步估计供试品的内毒素限值，设2个稀释倍数，一个为预期无干扰的较低稀释倍数，另一个为预期有干扰的较高稀释倍数，用这两个稀释倍数进行干扰实验，若结果符合要求，则可确定正式实验的稀释倍数范围；若不符合，则需另选稀释倍数再试。
正式实验：根据预实验结果，选择至少3个连续稀释倍数，含一个在最低稀释倍数和最高稀释倍数之间，且各稀释倍数的回收率均在50%-200%之间，此范围的稀释倍数可用于细菌内毒素检测。

其他考虑因素

除干扰实验外，还需考虑供试品的性质和内毒素限值。如限值较低，需较大稀释倍数；若供试品成分复杂，干扰因素多，也需多尝试不同稀释倍数以排除干扰。实际操作中可参考以往经验和相关文献，以更快找到合适稀释倍数。