有奖回答：涂布法和直接直接倒到培养基结果差异较大

大呆子

蒲友提问：


请教微生物检测方面的问题～样品和实验环境，实验员等条件一样的情况下，涂布法和直接直接倒到培养基混匀的检测结果差异很大。


回帖有奖

Lily_VIP

考虑以下几点原因：
1. 菌落分布与计数准确性：
   涂布法**通过将菌液均匀涂布在培养基表面，使得单个微生物细胞或孢子更有可能分散开来，形成单独的菌落。这有助于后续进行菌落计数，因为每个菌落通常来源于一个单一的微生物细胞，从而提供了一个直接计数活菌的方法。
   直接倒入并混匀的方法可能导致菌体聚集，形成较大的菌落或不规则的菌落分布，使得准确计数菌落变得困难。聚集的微生物可能抑制周围其他微生物的生长，导致计数偏低。
2. 氧气供应：
   涂布法形成的菌落在平板表面，更易于接触到空气中的氧气，这对于需氧或微需氧微生物的生长至关重要。因此，涂布法有利于这些微生物的生长。
   直接混入培养基中的微生物可能会被埋在琼脂较深处，限制了氧气的获取，特别是对于严格好氧的微生物，这会严重影响其生长和菌落的形成。
3. 热敏感性：
   涂布法避免了将菌液加入到过热的培养基中，减少了热敏感微生物的损伤。
   直接倒入热培养基中可能对某些微生物造成热休克，尤其是那些对高温敏感的微生物，导致其存活率降低。
4. 化学因素的影响：
   涂布法形成的菌落更适于观察化学因素对微生物的抑杀效应，因为它们在二维平面上的分布更容易评估。
   混入法可能使化学物质分布不均，影响对抑菌效果的判断。
因此，即便在样品和实验环境等其他条件相同的情况下，由于上述差异，两种方法得到的检测结果可能会有显著不同。涂布法通常被认为更适合于精确计数和观察微生物的生长特性。

鬼使神差

楼上完美答案

李辉zjl

楼上正解！

依然星期三

涂布法一般接种量为0.1ml。倾注法一般为1ml，接种量的差异也是原因之一，毕竟微生物的分布不均匀

chan8023

来学习学习

18581204807

谢谢，学习到了

滴滴龙

学习一下——

18581204807

学习一下，谢谢

门门

差异很大 是多大？
如果一个结果是0，一个结果有10个，也不算有多大差异，然后这两个结果可能还不是最终结果，若还有稀释倍数，那最终结果可能是 0（小于10cfu/g），100cfu/g，这是不是你所谓的的差异很大？

阿白wrr

来蹲蹲  学习学习

18581204807

感谢，感谢大佬感谢老是

lwjxz

学习学习

八档丶电风扇

其实涂布法、直接接种法、薄膜过滤法并没有多大差别，
比如我们在做方法验证的时候会同步做菌落计数（涂布法），不管是薄膜过滤法还是平皿法（直接接种），和菌落计数（涂布法）的菌落回收基本相差不大，
方法其实都是差不多的，造成差异的主要原因其实是在菌种稀释和接种后混匀的过程

秋刀鱼什么味

大神真多，学习了

ty949

菌落计数准确性：

涂布法：通过使用涂布棒将样品均匀地涂布在培养基表面，可以使样品中的微生物单个分散，从而在培养后形成单个菌落，便于准确计数。
平板倾注法：将样品直接倒入培养基中并与培养基混匀，可能导致样品中的微生物聚集，形成多个微生物团聚在一起，这可能导致计数时出现偏差，因为团聚的微生物可能会被计为一个菌落。
菌落分布均匀性：

涂布法：由于是手工操作，涂布法的均匀性可能受到操作技巧的影响，但通常可以较好地控制。
平板倾注法：样品与培养基混匀后，理论上应该分布均匀，但实际上可能会因为样品和培养基的密度差异、操作过程中的震荡等因素导致分布不均。
检测灵敏度：

涂布法：由于微生物单个分散，涂布法通常具有较高的灵敏度，适合检测低浓度的微生物样品。
平板倾注法：对于高浓度的样品，平板倾注法可能更为适合，因为它可以减少因样品稀释而导致的微生物浓度降低。
操作简便性：

涂布法：需要一定的技巧，包括涂布棒的使用和涂布速度的控制。
平板倾注法：操作相对简单，只需将样品与培养基混合即可。
结果的可重复性：

涂布法：如果操作得当，结果的可重复性较好。
平板倾注法：由于混匀过程中的变量，结果的可重复性可能较差。

ty949

ty949 发表于 2024-6-7 17:21
菌落计数准确性：

涂布法：通过使用涂布棒将样品均匀地涂布在培养基表面，可以使样品中的微生物单个分散 ...

总的来说，涂布法和平板倾注法在微生物检测中的主要区别在于菌落计数准确性和均匀性。涂布法更适合需要精确计数的低浓度微生物检测，而平板倾注法可能更适合处理高浓度的样品。

清风tfh

来学习学习一下

Yeb27cae4

学习一下，谢谢~~

逍遥自在005

俺也一样，楼上解答很好。