请问紫外检测蛋白含量的干扰因素有哪些？影响吸收系数的因素有哪些？

张寅

在药典四部蛋白含量检测中有第六法紫外可见分光光度法但是有提过一句“本法准确度较差，干扰物质多”
我们自己做了验证，觉得准确度还ok，基质也还行，没啥干扰，不知道具体干扰物质有点啥




另外，在通则0401中，吸收系数法中说，“吸收系数通常应大于100”，想问下为什么要大于100，影响吸收系数的因素有哪些？

cmx1997

芳香类化合物吧，如果有其它欢迎补充，还挺好奇

darlun

问题1
    1 对于那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质，该法有一定的误差。因此，这种方法更适用于与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。
2    样品中如果含有嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物质，会产生较大干扰。核酸强烈吸收波长为280nm的紫外光，而蛋白质恰恰相反，在280nm的紫外吸收值大于260nm的紫外吸收值。尽管可以通过计算适当校正核酸对于测定蛋白质含量的干扰作用，但不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不同的，因此测定结果仍存在一定的误差。

问题2
首先 了解下 吸收系数的定义 .......

吸收系数大于100通常意味着样品的吸收程度比标准曲线更高，这可以增加测量的准确性和可靠性。
在进行吸光光度分析时，需要保证样品的吸光度在标准曲线的线性范围内，以避免出现较大的误差。吸收系数大于100可以保证样品吸光度在线性范围内，从而获得更准确的测量结果。
吸收系数大于100还可以提高测量的灵敏度，使得分析方法更加可靠