无菌检测的问题

seamen

1.大家好，目前各药典规定的菌悬液的有效期为24h（黑曲霉、枯草芽孢杆菌除外），大家是不是都得每天制备菌液？计数后第二天用？我现在用的是稀释法培养计数，每天下午下班前稀释好了培养，第二天上午选择合适的梯度，下午用一次，感觉太费劲，有能说得过去的投机取巧的方法吗？ 2.无菌检测都是用的全封闭式培养器吧。1.药典规定要在最后一遍冲洗液中加入小于100cfu的菌液2.PIC/S规定不能再无菌室中操作菌液，大家在无菌分析方法验证时和日常的无菌检测时是怎样加阳性对照的？

seamen

唉     看了这个论坛上也没几个高手

四叶花

1、因为已经验证过，每次直接稀释到所需要的倍数，木有再做梯度
2、在阳性室操作呀

seamen

四叶花 发表于 2012-10-22 14:07
1、因为已经验证过，每次直接稀释到所需要的倍数，木有再做梯度
2、在阳性室操作呀

问低技术含量有点低
1.无菌检查用的菌液是小于100cfu，微生物限度用到的菌液是50-100cfu，你制备的菌液浓度是多少的？你验证的方法能保证每次制备都能获得50-100cfu的菌吗？
2.无菌验证中要求在“冲洗液”中加入小于100cuf的菌，那日常检测的方法也应该和验证方法一样在“冲洗液”中加入小于100cuf的菌，同意吗？你用的是三个连在一起的集菌培养器吗？你是怎么用带菌的冲洗液做阳性对照的？
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四叶花

seamen 发表于 2012-10-22 14:38
问低技术含量有点低
1.无菌检查用的菌液是小于100cfu，微生物限度用到的菌液是50-100cfu，你制备的 ...

楼主是一个做事非常认真的人！向你学习。说实在的，总不是做阳性对照，有时真没有必要去纠结于是50cfu还是100cfu，能正常生长就行。我们有时是用三连筒的，有时是用两连筒的，所以阳性对照组的操作也没那么固定，道理你明白的

seamen

四叶花 发表于 2012-10-23 09:01
楼主是一个做事非常认真的人！向你学习。说实在的，总不是做阳性对照，有时真没有必要去纠结于是50cfu还是 ...

唉，在微生物检测中解决不了的问题太多了，还请四叶花老师多多指点

圆and缘

中检所的操作规程中规定为了减少阳性菌对环境的影响，可以直接将小于100cfu的阳性菌加入供试液中，我们在生物安全柜中，3联管中的第三联直接用针头加入菌液

seamen

圆and缘 发表于 2012-10-23 12:19
中检所的操作规程中规定为了减少阳性菌对环境的影响，可以直接将小于100cfu的阳性菌加入供试液中，我们在生 ...

learning……，能提供一下中检所的规程吗？

圆and缘

中国药品检验标准操作规程无菌检查法中有此规定，第343页倒数第10行

燕长风2013

四叶花 发表于 2012-10-23 09:01
楼主是一个做事非常认真的人！向你学习。说实在的，总不是做阳性对照，有时真没有必要去纠结于是50cfu还是 ...

我觉得这个50-100cfu规定得太死，没办法每次都达到

四叶花

燕长风2013 发表于 2013-3-22 16:14
我觉得这个50-100cfu规定得太死，没办法每次都达到

每次都达到?那做得真的很不错哈

燕长风2013

四叶花 发表于 2013-3-22 20:47
每次都达到?那做得真的很不错哈

撞大运的时候能达到，大部分时间做不到，哈哈

四叶花

燕长风2013 发表于 2013-3-25 10:15
撞大运的时候能达到，大部分时间做不到，哈哈

所以少就少点好记数

lbq313

菌数只要小于100CFU就行了，不一定得大于50CFU，关键是生长良好就行。

峰行

燕长风2013 发表于 2013-3-25 10:15
撞大运的时候能达到，大部分时间做不到，哈哈

你们制备菌液没有记录吗？那你们记录上怎么填写？按实际情况填写吗？