薄层板GF254看荧光出现不规则黑点，是什么原因？

小影1

做五味子薄层鉴别时，展开剂是石油醚（30-60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15:5:1）的上层溶液，薄层板GF254板在波长254nm下看荧光，出现很多不规则黑点，是什么原因呢
重新换新的板子点都还是出现一样的情况，而且黑点的面积还不一样，是薄层板出问题了？

小影1

爱吃锦鲤型 发表于 2020-9-25 13:24
我还是怀疑展开剂，这个品种你以前做过么，展开剂配制过程会不会有问题

原料当时做过没问题，但不知道为什么做成品的时候就变成这样了，用的还是同一瓶的试剂来着。
不过当时有个小插曲，做原料的时候点过两次板，第一次是另一个同事点，也是出现黑点，后面换我来点，还是他配的展开剂，那次就跑得很成功。
所以现在我都不知道是为什么了，今天跑空板会有这样的黑点，加了样品对照去点板，黑点情况会变严重，不知道是不是也会跟这个有关系呢？！
我刚把样品、对照全部都重新提取了，所有试剂也都全部换新，只有一瓶没有新的可以换了，看看是不是还会这样，如果还这样，那估计就是那个试剂被污染了

小影1

微信64370992 发表于 2020-9-25 14:17
应该是展开剂的问题，空板上边沿那儿还有指头印

那个手印是跑完板之后，手去拿板看荧光留下的痕迹

爱吃锦鲤型

要不要考虑空板跑一下

小影1

爱吃锦鲤型 发表于 2020-9-25 09:50
要不要考虑空板跑一下

如果空板跑还是出现同样的问题，是不是代表薄层板不行了啊？

爱吃锦鲤型

小影1 发表于 2020-9-25 09:52
如果空板跑还是出现同样的问题，是不是代表薄层板不行了啊？

薄层板和展开剂都有嫌疑

小影1

爱吃锦鲤型 发表于 2020-9-25 09:55
薄层板和展开剂都有嫌疑

我第二次做的时候，也全部用了新开瓶的试剂去配展开剂，然后点的板，不过问题同样存在。现在先试试空板看看会怎样吧

美洛西林

有可能板的一边被污染了

小影1

美洛西林 发表于 2020-9-25 11:07
有可能板的一边被污染了

这个不太可能，我刚重新用空板跑了一次还是会存在这样的情况，同时也用这个批号的薄层板去做了其他品种的薄层鉴别，跑的效果都挺好的，不太可能是薄层板的问题吧 、图片的左边是跑的空板，右边是我刚跑了鸡血藤的薄层，两个都是跑完之后晾干，直接先看的荧光@爱吃锦鲤型

爱吃锦鲤型

小影1 发表于 2020-9-25 11:34
这个不太可能，我刚重新用空板跑了一次还是会存在这样的情况，同时也用这个批号的薄层板去做了其他品种的 ...

我还是怀疑展开剂，这个品种你以前做过么，展开剂配制过程会不会有问题

微信64370992

应该是展开剂的问题，空板上边沿那儿还有指头印

美洛西林

小影1 发表于 2020-9-25 11:34
这个不太可能，我刚重新用空板跑了一次还是会存在这样的情况，同时也用这个批号的薄层板去做了其他品种的 ...

看你写用的展开剂上层溶液，是不是这三种试剂不互溶，分层了，然后上层又带了些杂质

小影1

美洛西林 发表于 2020-9-27 09:12
看你写用的展开剂上层溶液，是不是这三种试剂不互溶，分层了，然后上层又带了些杂质

很大可能是溶剂的问题，但是分层的话还有待考察，因为到最后我全部试剂换新，样品、对照也都全部重新提取，除了有一瓶试剂没得换之外，那个黑点的情况，比之前减轻了。
估计最大的可能性还是层析液出了问题

岚中漫步

配制展开剂的时候，考虑一下配制的顺序，对吧、

ziyoutian

把展开剂比例换一下，感觉你下面还有东西没跑出来

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姚子豪

可能是甲酸腐蚀了薄层板，你可以试一下降低甲酸浓度

Whitetherain

博主后面解决了吗？是什么原因出现这种问题？