内毒素样品复溶后，调pH值晰出

15008038165 · 发表于 2020-4-10 09:48:13

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冻干成品，pH3~4，用BET水复溶后，可以完全溶解，有Tris缓冲液稀释来调pH值，会有很明显的的白色絮状物出现，泡沫很多，絮状物会跟着泡沫聚集在上步，尽量混匀后，做出来的结果是合格的，可以忽略白色絮状物的影响吗？或者说怎么证明出现絮状物是没有影响的？

ch3b388968 · 发表于 2020-4-10 10:14:56

我不是QC，我按照自己理解回答一下。首先白色絮状物肯定不能忽略，这个毫无疑问。然后你的目的是条PH还是测内毒素？你标题是测内毒素，不过问题出在加缓冲液调PH，这个加缓冲液是必要的吗？出现白色絮状物代表这个方法肯定要修改

joshua · 发表于 2020-4-10 10:46:09

LZ可能看到药典上关于样品溶液pH 一般控制再6~8的要求了，实际应该是控制最终反应体系（0.1mL 样品溶液和 0.1mL鲎试剂混合） pH在6~8即可，大部分鲎试剂本身就有缓冲作用，试着测一下最终反应体系pH，如果 pH没有再偏低，可以不用之前加tris 调节样品的溶液的pH

15008038165 · 发表于 2020-4-10 11:26:44

ch3b388968 发表于 2020-4-10 10:14
我不是QC，我按照自己理解回答一下。首先白色絮状物肯定不能忽略，这个毫无疑问。然后你的目的是条PH还是测 ...

是样品本身的问题，pH毕竟低，内毒素的样品的pH 需要在6~8，才不会影响凝胶

15008038165 · 发表于 2020-4-10 11:27:25

joshua 发表于 2020-4-10 10:46
LZ可能看到药典上关于样品溶液pH 一般控制再6~8的要求了，实际应该是控制最终反应体系（0.1mL 样品溶液 ...

试过了，5点多，差一点

火舞精灵 · 发表于 2020-4-10 11:51:45

析出的话，调pH用的缓冲液就是不适宜的，可以用其他方式，比如酸性产品可以用除热源后的碳酸钠调节

mwp58403 · 发表于 2020-4-10 11:59:56

只是建议，又没说非得在6-8，都学死了，你有做过不调pH测内毒素的吗？

joshua · 发表于 2020-4-10 12:12:56

15008038165 发表于 2020-4-10 11:27
试过了，5点多，差一点

也可以试一下用更高灵敏度的鲎试剂，这样可以用更低浓度的样品溶液，pH 应该就差不多了，调pH 太麻烦了

15008038165 · 发表于 2020-4-10 14:09:35

mwp58403 发表于 2020-4-10 11:59
只是建议，又没说非得在6-8，都学死了，你有做过不调pH测内毒素的吗？

没有试过，要符合药典要求啊

15008038165 · 发表于 2020-4-10 14:09:32

mwp58403 发表于 2020-4-10 11:59
只是建议，又没说非得在6-8，都学死了，你有做过不调pH测内毒素的吗？

没有试过，要符合药典要求啊

15008038165 · 发表于 2020-4-10 14:29:08

火舞精灵发表于 2020-4-10 11:51
析出的话，调pH用的缓冲液就是不适宜的，可以用其他方式，比如酸性产品可以用除热源后的碳酸钠调节

加了5%的碳酸氢钠，结果也是有析出

mwp58403 · 发表于 2020-4-10 14:43:04

15008038165 发表于 2020-4-10 14:09
没有试过，要符合药典要求啊

你可以再看看药典，咱们再来讨论

15008038165 · 发表于 2020-4-10 15:33:29

15008038165 发表于 2020-4-10 11:27
试过了，5点多，差一点

我试了一下。不行，pH值还是降不下来，如果只拿BET水稀释，试了很多遍，只要pH值达到标准，就会析出白色絮状物，可能是产品本身的问题，不知道该怎么做了

15008038165 · 发表于 2020-4-10 15:35:22

mwp58403 发表于 2020-4-10 14:43
你可以再看看药典，咱们再来讨论

pH值太低会干扰凝胶。可能出现假阴性

15008038165 · 发表于 2020-4-10 15:37:31

火舞精灵发表于 2020-4-10 11:51
析出的话，调pH用的缓冲液就是不适宜的，可以用其他方式，比如酸性产品可以用除热源后的碳酸钠调节

用5%的碳酸氢钠不行，还要试碳酸钠吗？

小金库 · 发表于 2023-4-22 09:41:24

谢谢蒲友分享。

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