2015中国药典抑菌效力检查样品中加菌浓度

lengling

把发在药典讨论中的帖子转这，想向大家请教关于抑菌效力检查的问题。
最近在做注射液的抑菌效力测定。学习了2015Ch.P中关于抑菌效力检查法的内容。发现了几个问题：
1.培养基适用性检查及方法回收率接受标准仍是70%.不知道是有什么特殊原因还是修改不完全。
2.2015Ch.P中规定，“每1g或1ml供试品中，接菌量为10的5次方到10的6次方”。对于这点，我觉得是药典有误。试想一下，如果样品具有抑菌作用，需要将样品稀释到10的-2次方甚至10的-3次方才能消除抑菌作用，那么样品中接菌量为10的5次方到10的6次方时，无法测定出3个对数降。所以这时，肯定需要提高供试液中接菌量到10的7次方到10的8次方才可能测出3个对数降的结果。
不知道大家有没有做过这方面的实验，有没有什么经验分享的！

yikinging

路过，打酱油

anluanna

供试品接菌量10的6次方，如果降3个对数应该可以测出来的。15版药典没有把具体的测试方法写出来，个人觉得不妨把10版的拿出来对比一下，大概还是差不多的。

lengling

假设样品种接菌量是“10的6次方每毫升”，但是若样品有抑菌性，需要稀释到10的-3次方才能够消除抑菌性而进行计数（也就是10的-1次方，10的-2次方样品不能通过方法验证的回收率）。
那么10的-3次方的样品中，最多的菌落数是“10的3次方每毫升”。然后，它要符合要求必须能下降3个log,也就是说10的-3次方的样品计数就是0了，对不对？

这样怎么办？

lengling

anluanna 发表于 2016-12-21 09:43
供试品接菌量10的6次方，如果降3个对数应该可以测出来的。15版药典没有把具体的测试方法写出来，个人觉得不 ...

假设样品种接菌量是“10的6次方每毫升”，但是若样品有抑菌性，需要稀释到10的-3次方才能够消除抑菌性而进行计数（也就是10的-1次方，10的-2次方样品不能通过方法验证的回收率）。
那么10的-3次方的样品中，最多的菌落数是“10的3次方每毫升”。然后，它要符合要求必须能下降3个log,也就是说10的-3次方的样品计数就是0了，对不对？

这样怎么办？

a72736650

确实是这个理，不过我通常做实验是按照接种数量来算的10的6次方或者10的7次方  没有“每毫升”。

anluanna

lengling 发表于 2016-12-21 09:55
假设样品种接菌量是“10的6次方每毫升”，但是若样品有抑菌性，需要稀释到10的-3次方才能够消除抑菌性而 ...

降三个对数 不是说稀释三个级别的意思。是分别计数不同时段的供试品菌液浓度，再计算对应对数的差值

lengling

anluanna 发表于 2016-12-21 15:01
降三个对数 不是说稀释三个级别的意思。是分别计数不同时段的供试品菌液浓度，再计算对应对数的差值

算了，你自己去看USP51吧。
做方法验证就是把样品依次稀释至10-1，,10-2,10-3，分别加入不超过100CFU的挑战菌，和阳性对照比，看回收率。
如果你做方法验证时，10-1，,10-2回收率达不到50%或70%，10-3达到了回收率，那么做抑菌测试时，就必须从10-3开始计数。

空心

我想问问NR和NI 的区别

z412710502

lengling 发表于 2016-12-21 17:39
算了，你自己去看USP51吧。
做方法验证就是把样品依次稀释至10-1，,10-2,10-3，分别加入不超过100CFU的 ...

你的问题解决了么，想知道一下现在是怎么做的呢。方法验证时，如果10-1 和10-2 回收率到不到要求，可以用10-3的么