答题有奖:如何把种子在无菌条件下输入发酵罐

冰鉴

冰鉴 发表于 2013-1-25 14:08
希望您看看在隔离器转移方案怎么样

要是C级就没太大问题了    现在现场是D级

刀锋1937

无菌连接器

dasheng1980

我说一下，可以用四组阀，把这阀和管道相连（121度灭菌），再把管道在超净台或生物安全柜下与种子的瓶子相连，将四组阀与发酵罐的预留接口相连，然后对四组阀之前暴露的部分进行在线灭菌，安装蠕动泵进行转种！

dasheng1980

灭菌时间为30分钟，和瓶子相连的的那端要有呼吸器，要冷却一下再转，不然阀门太热！

Ian-shang

一般养细菌的国产种子罐都是设计成火圈接种的，无论什么环境，你要是想做的在严格点就自己连根硅胶管（一定要可以和罐子一起灭菌的）吧，用泵把菌液泵进罐子，这一般需要在旁边配个超净台，硅胶管始端接根玻璃管，可以酒精灯灼烧灭菌，
进入小种子罐是用压力压入是不合适的，压力法适合罐罐之间

cph2345

建议你在小罐和大罐之间增加个固定管路，管路用CIP、SIP进行清洁和灭菌。转接的时候小罐通过压缩空气加压把菌液打到大罐中。彻底与环境的洁净级别无关。在D及即使安装了层流使用起来也是很不方便的。不过要花点钱了。这个奖该给我吧。

冰鉴

cph2345 发表于 2013-4-10 23:22
建议你在小罐和大罐之间增加个固定管路，管路用CIP、SIP进行清洁和灭菌。转接的时候小罐通过压缩空气加压把 ...

多谢兄弟    已经在这么使用了
隔离器   接种     倒罐     不锈钢小罐  ---压缩空气----   发酵罐     

cph2345

冰鉴 发表于 2013-4-11 08:30
多谢兄弟    已经在这么使用了
隔离器   接种     倒罐     不锈钢小罐  ---压缩空气----   发酵罐

哎，看来奖励是拿不到了。

冰鉴

但是你得到了蒲友    希望多和您学习

破晓之钟

冰鉴 发表于 2013-1-25 13:27
因培养、发酵需要在D级洁净室需要密闭系统(暴露部分需要无菌操作）依据为GB50457---2008附录A 药品生产环 ...

问个别的问题，你们的菌种用的隔离系统多少钱，我们正筹备改造事宜，隔离系统是一个讨论方向！！！

墨石

α-β阀；硬件改造；火圈。

glm1024

其他不知道，我只知道以前的公司，用带棉塞的三角瓶转移，在发酵罐的接种口（一般区 ）弄了个火圈，然后直接打开棉塞，倒进去搞定，从来没出过问题。


但这个方法是否被专家认可就不知道了。

ludezhi

种子可以通过蠕动泵接种至种子罐；
种子转移至发酵罐可以通过对管道进行灭菌并升高种子罐的罐压，将种子液转移至发酵罐中。

孙艳红

ludezhi 发表于 2014-3-30 13:08
种子可以通过蠕动泵接种至种子罐；
种子转移至发酵罐可以通过对管道进行灭菌并升高种子罐的罐压，将种子液 ...

常规的转移方法，也是最常用的种子液转移方法

听雨轩

我们现在仍沿用火焰保护的条件下接种，一般区就可以。

青莲

我们也是在罐区采用火焰保护接种，周围用屏风隔离，一般没问题的，最近FDA检察官都看了操作

dasheng1980

用四组阀比较好，不过麻烦一点，基本过程就是在生物安全柜或超净工作台的保护下将种子液转入到转种瓶中，转种瓶是先灭好菌的，并通过管道与可拆卸灭菌阀门相连，这个阀门可在连罐后通过纯蒸汽进行暴露一侧的灭菌，这样整个管路就可做到无菌了，但转种时要等阀门及金属管道凉了再用蠕动泵或压缩空气（不建议用，有危险）进行转种，不然可能会有部分种子死掉。

dasheng1980

我说的方法，在罐与罐之间也可以用

冰鉴

冰鉴 发表于 2013-4-11 08:30
多谢兄弟    已经在这么使用了
隔离器   接种     倒罐     不锈钢小罐  ---压缩空气----   发酵罐

隔离器中完成

大笨熊

1、可以用火圈法，一般去也可以，只要做得好，不会有问题。
2、首先接种瓶应有一个像茶壶嘴一样的输液法门，街上灭菌后的硅胶管，硅胶管一头连接接种瓶，另一头有用无菌步包裹好。
3、发酵罐也应有和硅胶管能相连接的阀门和接口。
4、接种前，接口用酒精消毒，用火圈做隔离，链接硅胶管，对发酵罐加压，再泄压。就把种子导入发酵罐中。
5、注意，必须在导完种子先关闭阀门，再撤离硅胶管。