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[质量控制QC] 考马斯亮蓝G250测定法测定蛋白

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发表于 2023-3-2 10:08:56 来自手机 | 显示全部楼层 |阅读模式

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本帖最后由 九五二七 于 2023-3-3 08:39 编辑

用考马斯亮蓝G250测定法测定蛋白,我这个操作步骤对么?请说下具体的操作步骤特别是对0号空白,
1677722908724.jpg
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药徒
发表于 2023-3-2 10:49:00 | 显示全部楼层
本帖最后由 拐角1 于 2023-3-2 10:50 编辑

你这个线性范围不对,你应该把蛋白浓度在0-0.1之间弄上5个点 找个线性,样品稀释到0-0.1再测

根据你的数据做的图

根据你的数据做的图
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 楼主| 发表于 2023-3-2 11:48:27 来自手机 | 显示全部楼层
我有几个问题想请教一下
我发的操作步骤是否正确,正确的话0号管不也有吸光度?为什么曲线是从0开始的,我的样品是不是需要把浓度降低让它的吸光度在对照品吸光度范围内?
然后,你再帮我看一下我这个稀释的对不对,这样的稀释浓度可以不
1677728863652.jpg
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 楼主| 发表于 2023-3-2 11:49:00 来自手机 | 显示全部楼层
拐角1 发表于 2023-3-2 10:49
你这个线性范围不对,你应该把蛋白浓度在0-0.1之间弄上5个点 找个线性,样品稀释到0-0.1再测

我有几个问题想请教一下
我发的操作步骤是否正确,正确的话0号管不也有吸光度?为什么曲线是从0开始的,我的样品是不是需要把浓度降低让它的吸光度在对照品吸光度范围内?
然后,你再帮我看一下我这个稀释的对不对,这样的稀释浓度可以不
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药徒
发表于 2023-3-2 16:45:23 | 显示全部楼层
你这样稀释可以,线性是可以的,从0开始就是为把空白值去除了,根据你的值可以得出计算公式:吸光度= 0.29000 + 0.03271×蛋白浓度

线性图

线性图
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 楼主| 发表于 2023-3-2 17:19:45 来自手机 | 显示全部楼层
拐角1 发表于 2023-3-2 16:45
你这样稀释可以,线性是可以的,从0开始就是为把空白值去除了,根据你的值可以得出计算公式:吸光度= 0.290 ...

那根据标准曲线如何找出样品对应的点,样品蛋白含量怎么计算呢?
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药徒
发表于 2023-3-3 07:59:51 | 显示全部楼层
微信u56fzaf7 发表于 2023-3-2 17:19
那根据标准曲线如何找出样品对应的点,样品蛋白含量怎么计算呢?

蛋白浓度=(吸光度值-0.29000)/0.03271
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 楼主| 发表于 2023-3-5 20:05:03 来自手机 | 显示全部楼层
拐角1 发表于 2023-3-3 07:59
蛋白浓度=(吸光度值-0.29000)/0.03271

那这两个数字是怎么计算出来的?这个公式是怎么组成的啊,
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 楼主| 发表于 2023-3-5 20:23:52 来自手机 | 显示全部楼层
拐角1 发表于 2023-3-3 07:59
蛋白浓度=(吸光度值-0.29000)/0.03271

老师您方便加下V不,我这方面没接触过,不太了解,想和您具体的沟通下,我的18300704080
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药徒
发表于 2024-7-3 21:54:06 | 显示全部楼层
老师们:大家的问题解决了没,我现在的问题是标曲是好的,但是样品大好多倍,超标了
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