关于细菌内毒素的问题

木公1

  各位道友，关于细菌内毒素的有个问题一直在困惑中，我们是生产医疗器械的，                           根据GB/T14233.2中，每件器械的限值为20EU/件，样品的浸提液体积计算V=L/λ,我们使用的0.5EU/ml的鲎试剂，换算下来是40mL的浸提液；

                                 根据YY/T0618  医疗器械试验内毒素限值（EU/mL)=KN/V，因为每件产品都是单独做的，所以N=1，K=20，V=40mL,求得试验内毒素限值为0.5EU/mL;
                                 最大有效稀释倍数MVD=试验内毒素限值/λ=0.5/0.5=1倍。
                    以上如果没错的话那问题就来了，YY/T0618中8.4.2.1说样品溶液稀释度应小于或等于MVD，通过上面的公式算下来是1，
                                       ①那我们日常检验的浸提液的体积应≤每件/40mL还是只能=每件40mL呢，
                                       ②但是日常检测样品浸提5mL基本就够用了，要是按照40mL的算MVD=8了
                              关于这两点求道友解答一下，不胜感激！！

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canus

1，看您制定的标准是20EU/件，还是＜0.5EU/mL.
2,2种理解：2.1按照20EU与0.5EU/mL,需要体积40mL.内毒素试验与产品需要做干扰的，MVD多少都需要做干扰。MVD是倍数，不存在0.5倍数，所以日常定的是40mL;若选择10mL,相当于标准为5Eu/件，对于生产方来说，风险大一些；
2.2鲎试剂灵敏度可以有多种的，不只是0.5的，可以选择更大的，从而确定浸提液的体积，都需要做灵敏度复核与内毒素干扰。
3 根据5mL是完全浸没产品的体积，但不是内毒素20EU/件的体积。需要分清楚。

fireflame

换高灵敏度的鲎试剂，MVD自然会变大，然后就会有更多选择余地了。选择合适灵敏度的鲎试剂而不是固定鲎试剂灵敏度，然后去调节其他参数。

木公1

canus 发表于 2023-1-16 11:59
1，看您制定的标准是20EU/件，还是＜0.5EU/mL.
2,2种理解：2.1按照20EU与0.5EU/mL,需要体积40mL.内毒素试 ...

我们制定的标准是20EU/件，目前在用的鲎试剂是0.5eu/mL的，换算下来MVD=1，是不是就可以理解为用5毫升浸提完了不能在稀释，直接进行试验；还是说浸提的5mL与40mL混匀在进行试验。就是说我这个MVD算下来是1，我是按照换算下的V（40mL）还是我产品实际的体积（5mL）。
如果可以的话我只参考14233上的内毒素限度值（20eu/件），V=L/λ我就不管了，后面就直接以实际产品浸提的体积按照0618上算试验内毒素限值和MVD，比如说我产品实际是5mL,0.5的鲎试剂，算下来就是MVD=8，那我是不是就是最多只能用40mL的BET水来浸提产品了

木公1

fireflame 发表于 2023-1-16 15:12
换高灵敏度的鲎试剂，MVD自然会变大，然后就会有更多选择余地了。选择合适灵敏度的鲎试剂而不是固定鲎试剂 ...

如果不考虑14233上的V=L/λ，选择灵敏度越高的鲎试剂稀释倍数也就越大，仅考虑0618上面的我们目前的0.5鲎试剂是可以满足使用的。

canus

现在按照20EU的话，你的量就是40mL，不能少也不能多（条件控制），不然做干扰试验；也可以考虑0.125EU/mL，那么体积就会增加；直接将产品泡到40mL，内外部了，就不是产品内部；
若只是用0.5eu/ml的鲎试剂灵敏度+5ml浸提溶液，相当于2.5EU/件进行控制。小于2.5自然＜20，加严控制，干扰没问题就行呀。
我看您说得MVD=8是错误理解，算出来是40ml，你用的是5ml，这不能稀释，是浓缩呀。所以不能这么算MVD

木公1

canus 发表于 2023-1-16 15:52
现在按照20EU的话，你的量就是40mL，不能少也不能多（条件控制），不然做干扰试验；也可以考虑0.125EU/mL， ...

噢噢，这么一说顿时豁然开朗了

我会发光bhh

楼主 您的问题解决了嘛？最近我们也在弄细菌内毒素资料，我跟您描述的情况类似，我们选择的是0.25eu的计算下来产品的浸提体积是80ml。那么我的最大浸提体积是80，那我的最大稀释倍数是多少？是1？。有点懵做实验时可以直接用浸提液直接进行测试嘛？

xiaoyuxinqiong

我会发光bhh 发表于 2024-6-15 21:01
楼主 您的问题解决了嘛？最近我们也在弄细菌内毒素资料，我跟您描述的情况类似，我们选择的是0.25eu的计算 ...

我的理解是如果你的是20EU/件，算的最大稀释体积是80ml.最大稀释倍数就是80？