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[确认&验证] qPCR性能确认项目问题

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药徒
发表于 2022-8-19 15:42:00 | 显示全部楼层 |阅读模式

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如题,公司内部要求我们组能对qPCR进行性能确认,目前能想到的的确认内容有:升温速率、降温速率、模块温控精度、温度均匀性、温度持续时间准确度、样本线性。至此为止,都是目前我们能做出来的项目,下面的几个项目一直没有头绪,荧光强度检测重复性、不同通道荧光干扰、荧光线性、荧光强度检测精密度,这四个项目有参照规程,但是不知道该如何具体实施,包括选用何种标物及操作步骤。设备型号是ABI 7500。望各位老师能给一点宝贵意见。
ps:和公司交流过,让厂商来做,但是公司不同意,还是要求我们自己做。。。
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药生
发表于 2022-8-19 16:34:20 | 显示全部楼层
让厂家做 或者第三方验证公司
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药徒
 楼主| 发表于 2022-8-19 16:36:36 | 显示全部楼层
依然星期三 发表于 2022-8-19 16:34
让厂家做 或者第三方验证公司

第三方验证公司问过很多了,诸如华测,SGS,他们都只能提供温度类的计量,厂家的话,我们公司不同意觉得太贵了。
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药生
发表于 2022-8-19 16:52:45 | 显示全部楼层
随便写一写,反正审核的人也看不懂...
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药徒
 楼主| 发表于 2022-8-19 17:03:26 | 显示全部楼层
黑喵警长 发表于 2022-8-19 16:52
随便写一写,反正审核的人也看不懂...

我想捣浆糊,可是上面的不让捣浆糊

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“上面”只会提要求,好歹给个指导性意见啊!他咋不说,你去解决一下全民用药安全问题!! 真把自己当老大了。  详情 回复 发表于 2022-8-19 17:09
荧光强度检测重复性,重复走几次同一个空板,定个偏移标准,就行  发表于 2022-8-19 17:07
能看懂的就根据意见改 哈哈  发表于 2022-8-19 17:06
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药生
发表于 2022-8-19 17:09:44 | 显示全部楼层
787974841 发表于 2022-8-19 17:03
我想捣浆糊,可是上面的不让捣浆糊

“上面”只会提要求,好歹给个指导性意见啊!他咋不说,你去解决一下全民用药安全问题!!
真把自己当老大了
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药徒
 楼主| 发表于 2022-8-22 08:44:08 | 显示全部楼层
hellozijia 发表于 2022-8-19 17:09
“上面”只会提要求,好歹给个指导性意见啊!他咋不说,你去解决一下全民用药安全问题!!
真把自己当老 ...

就不指望他们了=。= qPCR是什么都不知道的,到最后还是我们技术扛
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药徒
 楼主| 发表于 2022-8-22 08:45:53 | 显示全部楼层
787974841 发表于 2022-8-19 17:03
我想捣浆糊,可是上面的不让捣浆糊

ok,感谢,现在就是照着厂家说明书在那里翻译了
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药徒
 楼主| 发表于 2022-8-22 11:39:52 | 显示全部楼层
刚才致电ABI,问他们这台设备有什么可以参考的规程或者国标,他们来一句我嗯设备出的比国标早,不认可他们。。。。。上面的又在催=。=
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药徒
发表于 2022-9-8 22:50:40 | 显示全部楼层
楼主肯定是在做设备的验证了,找不到第三方的话,我的建议是温度的计量,可以请第三方出具(费用在几百),每年的荧光信号校准(费用在一万),可以请ABI公司,综合两家的报告,得出你自己的报告。自己做,几乎不可能,荧光信号很多,基本的信号,你需要有ROX\FAM\CY5\VIC等等的荧光试剂,需要各种标准品,需要一台荧光光谱仪,定量结束后,需要自己设置方案,自己去分析数据,一个公司(哈哈,除了我们)几乎不大可能有这么多东西。。。。。另外,偷偷告诉你,有计量的第三方做荧光信号的,只是你没找到
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药徒
 楼主| 发表于 2022-9-23 15:22:24 | 显示全部楼层
小布ivd 发表于 2022-9-8 22:50
楼主肯定是在做设备的验证了,找不到第三方的话,我的建议是温度的计量,可以请第三方出具(费用在几百), ...

已经自己做完啦,谢谢啦

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有没有方案参考下,哈哈哈  详情 回复 发表于 2022-12-1 14:46
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药生
发表于 2022-12-1 14:46:57 | 显示全部楼层
787974841 发表于 2022-9-23 15:22
已经自己做完啦,谢谢啦

有没有方案参考下,哈哈哈

点评

老师 我也想参考下方案  详情 回复 发表于 2023-5-8 09:19
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药徒
发表于 2023-5-8 09:19:38 | 显示全部楼层
发呆DZH 发表于 2022-12-1 14:46
有没有方案参考下,哈哈哈

老师  我也想参考下方案
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发表于 2023-5-30 10:03:55 | 显示全部楼层
老师,有没有方案参考一下
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药徒
发表于 2023-6-3 19:02:02 | 显示全部楼层
老师  我也想参考下方案
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发表于 2023-6-28 11:43:38 | 显示全部楼层
787974841 发表于 2022-9-23 15:22
已经自己做完啦,谢谢啦

方案可以参考下吗?求求了
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发表于 2023-6-29 08:50:04 来自手机 | 显示全部楼层
787974841 发表于 2022-9-23 15:22
已经自己做完啦,谢谢啦

老师,我也想要一份方案参考一下
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