枳实含量测定辛弗林出峰时间短，怎么解决？

single138 · 发表于 2022-1-13 15:40:41

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大神们，枳实液相条件：以甲醇-磷酸二氢钾溶液（取磷酸二氢钾0.6g，十二烷基磺酸钠1.0g，冰醋酸1ml，加水溶解并稀释至1000ml）（50∶50）为流动相；检测波长为275nm。理论板数按辛弗林峰计算应不低于2000；色谱柱使用ZORBAX Eclipse PlusC18。用岛津LC-20AT设定条件为30℃，流速1ml/min；出峰很完美，如图所示。但是用相同的条件和色谱柱在安捷伦1260Ⅱ出峰时间是2.5分钟左右，杂质根本分不开（岛津液相是上家公司的型号，安捷伦是现在这家公司型号）。请有破解的大神么？

可亲可爱 · 发表于 2022-1-13 16:32:17

照理就换一下仪器也不会保留时间差这么多的啊。流动相有没有配制错误？使用的试剂牌子也是一样的吗？离子对试剂影响可能性比较大的

single138 · 发表于 2022-1-13 20:42:41

对比了的，试剂的牌子不一样，但是百分含量都差不多

天晴j7b · 发表于 2022-1-14 10:22:42

磷酸氢二钾用的是一样的吗？会不会之前用无水磷酸氢二钾，现在用的十二水合磷酸氢二钾

风半起 · 发表于 2022-1-14 11:09:29

楼主用相同的条件和色谱柱在安捷伦1260Ⅱ出峰时间是2.5分钟左右，基本上看你的样品是没有在色谱柱保留的，液相死体积时间也就2分钟左右；反相液相样品不保留原因，一是没有安装色谱柱，二是流动相是纯有机相。
楼主配制的流动相是混合的还是有机与水相分开的？如果是分开的，水相的那个流动相通道可能有问题，排查一下玻璃滤头，管路是否有气泡，可尝试将水相放别的通道进行测试；如果流动相是混合的，看仪器设置条件是不是通道设置错误，没错那就难搞。

single138 · 发表于 2022-1-14 11:11:41

多谢建议，流动相是分开的，我怀疑是十二烷基硫酸钠的问题，我换个品牌再买一瓶来试试。

小新1234 · 发表于 2022-1-18 10:35:59

1、是否用的150mm的短柱，换250mm的长柱试试。2、调低有机相比例

single138 · 发表于 2022-1-23 10:55:13

小新1234 发表于 2022-1-18 10:35
1、是否用的150mm的短柱，换250mm的长柱试试。2、调低有机相比例

跟色谱柱没关系，跟十二烷基硫酸钠有关系。我只能说卖试剂的厂家圈钱很厉害。

琉星 · 发表于 2022-3-14 10:35:01

我也碰到这个问题了，21年12月份做过一次，Waters ARC和安捷伦1260分别进样，保留时间都是20多分钟，峰型也很好，但现在再进样，保留时间时间都变成了2.5分钟左右，方法什么的都没改，流动相所用的试剂（磷酸二氢钾等）都是同一瓶的，包括色谱柱都是一样的，甚至还试过把流动相混合和分开，更换色谱柱，但两台仪器都是这样，保留时间还是在2.5分钟左右，很难理解

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xxxr1028 · 发表于 2022-3-14 14:32:21

可能是流动相的PH值影响。

感谢经历1 · 发表于 2022-3-15 08:34:56

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562226209 · 发表于 2022-3-15 08:49:38

时间短，怎么了。不能用吗？

single138 · 发表于 2022-4-1 10:13:20

562226209 发表于 2022-3-15 08:49
时间短，怎么了。不能用吗？

试剂有问题

single138 · 发表于 2022-4-1 10:17:24

琉星发表于 2022-3-14 10:35
我也碰到这个问题了，21年12月份做过一次，Waters ARC和安捷伦1260分别进样，保留时间都是20多分钟，峰型也 ...

如果也是同样类型的问题，跟磷酸二氢钾试剂的关系不大，出峰时间短提前跟十二烷基磺酸钠有关系，因为它是离子对试剂，如果离子对试剂出问题，样品目标物质不会被色谱柱吸附，出峰就会提前。

15715606201 · 发表于 2022-4-1 10:37:55

如果进样时间一直后延，就是环境和色谱柱未平衡好，如果没有后延，那应该就是试剂厂家的影响了，岛津和安捷伦虽然工作原理不太一样，但一般是梯度条件差异大，等度的都还好

areyouok · 发表于 2022-5-8 19:04:38

想问下楼主样品处理需要注意些啥？我们做出来辛弗林含量很低

杯水车薪，薪水 · 发表于 2022-5-9 14:00:07

十二烷基磺酸钠大概率出问题了，之前跑了N遍没有出来然后找领导从新买了瓶配出来流动相就跑出来了，还有就是我一般都是连甲醇都掺到里面混匀后用一个通道这样！

single138 · 发表于 2022-5-11 09:09:36

areyouok 发表于 2022-5-8 19:04
想问下楼主样品处理需要注意些啥？我们做出来辛弗林含量很低

样品正常处理就行了呀，我们做出来也不合格。换了货就可以了

single138 · 发表于 2022-6-17 14:56:26

areyouok 发表于 2022-5-8 19:04
想问下楼主样品处理需要注意些啥？我们做出来辛弗林含量很低

我们做出来还不是不合格

18308792524 · 发表于 2024-7-10 17:01:44

你好，请问你的辛弗林出峰时间短的问题是怎么解决的呀？我们也是尝试过很多条件，最好的效果也只是到四分钟左右