关于TSA培养基凝固后颜色变化

Iris忱 · 发表于 2021-5-7 16:35:06

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今天配了一批沉降菌碟子，凝固后发现有两种颜色，先倒的培养基颜色正常，为淡黄色；后倒的培养基颜色比较浅，发白。用的同一瓶TSA，中海生物的，配方比例没有问题，灭菌温度、时间正常，盛在同一个锥形瓶中，用前有摇匀。请教各位，这是什么原因导致的？会有影响吗？

mimimipa · 发表于 2021-5-7 16:52:28

倒碟的厚度呢收碟时间呢

麓杳 · 发表于 2021-5-7 16:54:27

我们是用成品，没做碟子

咒逐 · 发表于 2021-5-8 10:40:26

没摇匀，白色的是琼脂

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歪说歪有李 · 发表于 2021-5-8 10:51:10

咒逐发表于 2021-05-08 10:40
没摇匀，白色的是琼脂

楼主没发图，倾向于你的观点。

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Iris忱 · 发表于 2021-5-17 09:45:14

mimimipa 发表于 2021-5-7 16:52
倒碟的厚度呢收碟时间呢

大概20ml/皿。收碟时间是一致的，即冷却时间，约1小时

Iris忱 · 发表于 2021-5-17 09:48:46

咒逐发表于 2021-5-8 10:40
没摇匀，白色的是琼脂

有可能，预培养的阳性碟，发白的培养基菌长的特别多

Iris忱 · 发表于 2021-5-17 09:50:18

歪把子发表于 2021-5-8 10:51
楼主没发图，倾向于你的观点。

嗯，根据预培养的结果来看，极有可能是没混匀。

歪说歪有李 · 发表于 2021-5-17 09:51:51

Iris忱发表于 2021-05-17 09:50
嗯，根据预培养的结果来看，极有可能是没混匀。

不是没混匀，是赶着做实验，没化透。

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Iris忱 · 发表于 2021-5-17 10:01:56

歪把子发表于 2021-5-17 09:51
不是没混匀，是赶着做实验，没化透。

湿热灭菌116摄氏度，30分钟，取出后60摄氏度水浴保温15分钟左右，化透了吧？

Iris忱 · 发表于 2021-5-17 10:03:03

Iris忱发表于 2021-5-17 10:01
湿热灭菌116摄氏度，30分钟，取出后60摄氏度水浴保温15分钟左右，化透了吧？

我觉得更可能是用前摇匀时间短了？

Iris忱 · 发表于 2021-5-17 10:48:03

Iris忱发表于 2021-5-17 10:03
我觉得更可能是用前摇匀时间短了？

嗯，下次配培养基的时候延长摇匀时间，看看情况

咒逐 · 发表于 2021-5-18 08:35:23

本帖最后由咒逐于 2021-5-18 08:38 编辑

Iris忱发表于 2021-5-17 09:48
有可能，预培养的阳性碟，发白的培养基菌长的特别多

没太看懂预培养的阳性是什么意思，预培养出现阳性结果这瓶琼脂不是就该丢了么，长菌的琼脂怎么用...如果是种阳性菌，我没用过。
如果是使用电热套加热搅拌到微沸后再分装的，基本不会出现这种情况。
如果是使用大容器直接加干粉加水搅拌透而不加热，利用湿热灭菌的温度来溶解，就极易发生这种情况，因为琼脂溶液比重大，形成分层，只要没有足够的扰动，就不会均匀的。同时因为容器大，不是反复倒置的振摇基本不会摇的均匀，这种在冷却后的分层也会比较明显。要解决也简单，就是在琼脂冷却到80-90℃左右的时候上下颠倒几次就好了，注意防止过热暴沸（刚灭完菌时）和过冷摇（产生自然消除不掉的气泡）。当然有合适大小的漩涡振荡器摇个分把钟也是OK的。

Iris忱 · 发表于 2021-6-23 14:47:55

咒逐发表于 2021-5-18 08:35
没太看懂预培养的阳性是什么意思，预培养出现阳性结果这瓶琼脂不是就该丢了么，长菌的琼脂怎么用...如果 ...

好的，谢谢解惑

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