原核与真核发酵、纯化生产线GMP符合性设计要求

听风随行

大家好，目前正在做一条生物制品生产线，有原核和真核发酵、纯化及无菌生产线的概念设计，由于场地限制，要设计得比较紧凑，因此在此请教各位一些问题，看是否符合GMP要求，如下：
1、原核与真核发酵线是要分开，但分别以什么级别的洁净区适合呢？原核是D级是否可以？真核以C级是否可以？按道理C和D其实只是换气次数差别，其它差别不大。
2、原核与真核发酵线的空间消毒分别用什么方式？臭氧？甲醛熏蒸？气态过氧化氢？当然这个气态过氧化氢这个肯定最好，但也要考虑成本问题。
3、原核与真核发酵之后的纯化，是否可以共线了？C级应该可以了吧？空间的灭菌方式呢？
4、酵母与一般的原核及真核应该也不能共发酵线吧？

请大家多多指教，谢谢！

zw20050203

听风随行 发表于 2020-12-3 08:57
谢谢！真核细胞大家都是说要无菌操作，建议C级背景，另外酵母虽是真核细胞，但也是单细胞真菌，容易污染 ...

C/D并不是关键，关键是的生物安全柜的效果，还有操作人员的意识。想想当初实验室里都是普通区域+一个安全柜，但是操作人员意识到了，那问题就少得多，相反，就算你搞一个B级区，然后操作人员没有无菌意识操作，问题可能都会频繁出现
当然以上只是个人观点。

zw20050203

1发酵区域建议都是D级.
2消毒方式个人建议从设备上考虑，臭氧最简单，但是腐蚀设备比较严重，另外两个没接触过，效果应该比臭氧好些。
3纯化C级够，关键操作区域设计成C+A或者考虑生物安全柜的方式。空间消毒考虑和发酵区域一样。
4酵母不是真核么？你是想问同一条线多个品种共用的意思么？这个就的做清洁验证了，首先在设计上要避免交叉污染，其次是证明设计和实际是一致的（跟换品种后没有污染的可能）
以上个人愚见。希望能对你起到一些作用

听风随行

zw20050203 发表于 2020-12-2 13:24
1发酵区域建议都是D级.
2消毒方式个人建议从设备上考虑，臭氧最简单，但是腐蚀设备比较严重，另外两个没接 ...

谢谢！真核细胞大家都是说要无菌操作，建议C级背景，另外酵母虽是真核细胞，但也是单细胞真菌，容易污染其它的，因此目前还在考虑是否能共线，或者是否可以共线但不同房间不同的发酵罐。

至于纯化，大部分都是认为不管真核或者原核蛋白，纯化一起应该可行。

听风随行

zw20050203 发表于 2020-12-3 10:15
C/D并不是关键，关键是的生物安全柜的效果，还有操作人员的意识。想想当初实验室里都是普通区域+一个安全 ...

是的，但现在要按GMP要求来，首先要从硬件及规划上规范，这个定了后期没法改动了，之前做过一条真核细菌发酵的治疗性生物制品药物，现在增加真核产品，因此想在这里让大家解惑，在前期发酵是分开，从纯化到无菌生产共线，这样是否符合GMP的要求

小金库

谢谢分享。

金色阳光ejs

请教楼主，发酵是单独的洁净区还是和纯化在同一个区域。如果在同一个区域是否是CIP、SIP，完全密闭操作，以避免可能污染洁净环境。