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[无菌&限度检查] 培养基说明上写的“121℃ 15min”究竟指什么?

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药徒
发表于 2019-3-19 12:48:14 | 显示全部楼层 |阅读模式

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x
1. 告诉你该培养基灭菌方法;选择其他方法无法有效灭菌;
2.告诉你该培养基耐受度;上述温度时间是可接受的上限;
如果选是2,请继续回答:
该温度时间指的是:
1.121℃ 15min是灭菌设备腔体的温度&时间;探头测试腔体;
2.是培养基自身达到121℃ 15min(探头放入液体);
如果选择1,请问:装载量很少(只放了10ml 温度几乎同步)和很多时(2000ml,灭菌结束了瓶内温度都没到110℃),培养基实际温度差异很大,那么这个指标有意义吗?
如果选择2,请问:培养基耐受度是个客观值;灵敏度促生长只是检测手段;那是不是意味着我在120℃迟迟升不上去,如此持续灭菌很久,比如两个小时也不会对培养基营养成分带来负面影响?
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药徒
发表于 2019-4-15 19:58:25 | 显示全部楼层
Attackill 发表于 2019-4-12 15:29
这是因为大容量观察腔体费时费力废验证。但是大容量的,瓶内探头,没必要灭15min吧?你们可接受标准,是 ...

探头直插瓶内,以灭菌后F0。如果以整个过程来计、那么有的大容量瓶内有可能达不到121度F0就到了,因为升温过程,越接近灭菌温度温升越慢,F0却稳步上升,这时候再以F0是不行的,所以推荐大容量的做穿透处理。如果环境温升和瓶内温升相差不大,可以以环境温度计,如果相差大,建议穿透
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药生
发表于 2019-3-19 13:16:39 | 显示全部楼层
学习学习,等大神回答
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药徒
发表于 2019-3-19 13:29:42 | 显示全部楼层
个人感觉倾向于1,但也不能说其他方法无法做到有效灭菌,只能说这个方法是经过确认的
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药士
发表于 2019-3-19 13:39:17 | 显示全部楼层
坐等答案,倾向1
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药徒
发表于 2019-3-19 13:52:27 | 显示全部楼层
个人倾向1,然后1后面的后续回答,这个应该是做高温高压灭菌锅验证的时候进行确认的,最多一次性放多少量。
对于1中,其他方法无法有效灭菌不赞同,这个应该只是提供了一个有效的灭菌方式,仅此而已。
个人理解,等待其他老师回复。
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药徒
发表于 2019-3-19 14:17:14 | 显示全部楼层
我觉得应该选择 1 ;首先,2000ml的培养基不能用 2000ml的锥形瓶来装载,装载要求不能过半或者不能超过2/3;不存在 15min 灭菌结束,分装的瓶内的液体还没有达到120℃这种情况。
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药徒
发表于 2019-3-19 14:36:50 | 显示全部楼层
问厂家不就得了 瞎猜没用
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药生
发表于 2019-3-19 14:58:09 | 显示全部楼层
灭菌条件。
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药徒
发表于 2019-3-19 14:58:27 | 显示全部楼层
为什么不能都是呢?我个人认为121℃、15min既是一个下限也是一个上限。
下限是指在此条件下灭菌后才能够达到可以使用的要求。
上限是指超过此条件灭菌后可能会由于一些原因(如培养基的一些理化性质)改变后,不可使用。
我之前有接触过培养基的灭菌时间确认,就涉及到了这个。当时我们是选择培养基内部作为测试位点进行的确认。
再说最后一点,温度与时长的问题,如果如楼主所说120℃、2h那必然是无法正常使用了,所以我认为可以引入F0值来作为参考标准。
当然了,这些都是我个人的经验和意见,还是需要咨询厂家的~
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药徒
 楼主| 发表于 2019-3-19 15:22:26 | 显示全部楼层
萌新 发表于 2019-3-19 14:36
问厂家不就得了 瞎猜没用

代理供应商并不懂,也讲不出道理
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药徒
发表于 2019-3-19 15:24:23 | 显示全部楼层
Attackill 发表于 2019-3-19 15:22
代理供应商并不懂,也讲不出道理

瓶子上有厂家吧
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药徒
 楼主| 发表于 2019-3-19 15:27:05 | 显示全部楼层
fuyibo 发表于 2019-3-19 13:29
个人感觉倾向于1,但也不能说其他方法无法做到有效灭菌,只能说这个方法是经过确认的

第一个问题的1?但是不耐热培养基的温度就是耐受度指导值;具体灭菌方法,理论上,各种指南,选择树都有,厂家给这个意义不大。
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药徒
 楼主| 发表于 2019-3-19 15:31:22 | 显示全部楼层
托马斯刘 发表于 2019-3-19 14:17
我觉得应该选择 1 ;首先,2000ml的培养基不能用 2000ml的锥形瓶来装载,装载要求不能过半或者不能超过2/3 ...

2000ml只是举例说明腔体装载量不同;不过之前遇到过10L瓶子装3000ml的。
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药徒
发表于 2019-3-19 15:40:30 | 显示全部楼层
Attackill 发表于 2019-3-19 15:31
2000ml只是举例说明腔体装载量不同;不过之前遇到过10L瓶子装3000ml的。

那你这种装载方式有做过验证吗?或者可以重新验证,将液态分装至适当的锥形瓶中。进行确认
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药徒
 楼主| 发表于 2019-3-19 15:42:07 | 显示全部楼层
萌新 发表于 2019-3-19 15:24
瓶子上有厂家吧

你并不明白问题所在。那么我说的明白点,欧盟灭菌决策树上写121℃15分钟灭菌,请问这句话的意思是指在121℃下灭菌15分钟,还是指物体要达到121℃,维持15分钟以上?
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药徒
发表于 2019-3-19 16:04:11 | 显示全部楼层
Attackill 发表于 2019-3-19 15:42
你并不明白问题所在。那么我说的明白点,欧盟灭菌决策树上写121℃15分钟灭菌,请问这句话的意思是指在121 ...

灭菌器验证不是有验证热穿透?灭菌15分钟,结果是无菌,不就成了
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药徒
发表于 2019-3-19 16:08:12 | 显示全部楼层
萌新 发表于 2019-3-19 16:04
灭菌器验证不是有验证热穿透?灭菌15分钟,结果是无菌,不就成了

不还有一个培养基适应性检查,做一遍就有答案了吧
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药徒
 楼主| 发表于 2019-3-19 17:05:09 | 显示全部楼层
萌新 发表于 2019-3-19 16:04
灭菌器验证不是有验证热穿透?灭菌15分钟,结果是无菌,不就成了

验证只看F0值;现在的问题是方法选择。121*15是最后方法。你直接就验证最后方法,倒是爽快。那么腔体121C 15分钟灭菌结果发现不行,你接下来怎么处理?
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药徒
 楼主| 发表于 2019-3-19 17:07:39 | 显示全部楼层
托马斯刘 发表于 2019-3-19 15:40
那你这种装载方式有做过验证吗?或者可以重新验证,将液态分装至适当的锥形瓶中。进行确认

大型设备,6个这么大的。不算升降温,灭了将近1小时……但是这个培养基皮实,所以随意搞。实际上是探头塞里面的。验证肯定做啊。
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药徒
发表于 2019-3-19 17:51:50 | 显示全部楼层
Attackill 发表于 2019-3-19 17:05
验证只看F0值;现在的问题是方法选择。121*15是最后方法。你直接就验证最后方法,倒是爽快。那么腔体121C ...

哪里不行啊  有没有想过啊  培养基适用性做不了还是空白长菌啊
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