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[质量控制QC] 关于液相色谱柱冲柱方法的咨询

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药徒
发表于 2017-10-11 14:46:12 | 显示全部楼层 |阅读模式

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向各位老师请教一下色谱柱冲柱流程,qc呆了一年多,经验不足,发现我们使用的色谱柱柱效下降的很快,在排除平时使用都比较规范外,还有什么原因。目前想到的一点就是我们的冲柱方法,麻烦指导一下,不确定有没有问题。取个例子:氨基柱,反向系统使用,流动相含有乙腈的流动相,pH磷酸调的。
跑完样品后冲柱方法是,流速0.5ml/min,
乙腈:水=,20:80,30分钟;
乙腈:水=,40:60,30分钟;
乙腈:水=,60:40,30分钟;
乙腈:水=,80:20,30分钟;
乙腈:水=,100:0,60分钟。
问了别的公司,相同的检验条件,冲柱是流速1ml/min,乙腈:水=,90:10,30分钟;乙腈:水=,100:0,30分钟,结束。
麻烦各位老师提提意见
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发表于 2017-10-11 15:23:14 | 显示全部楼层
其实色谱柱冲洗没必要那么麻烦90:10,50:50,100,梯度升高就可以啦,即使含有盐也没事,顶多在低浓度时多冲洗下,流速可以设定低点,流速大小还是要看柱子压力大小
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药徒
发表于 2017-10-11 15:29:10 | 显示全部楼层
看什么柱子,说明书有通用方法。看什么样品,自己在方法上改进
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药徒
发表于 2017-10-11 16:01:35 | 显示全部楼层
可能是样品太脏,柱子前面被堵了,建议以后用此柱时加保护柱。

点评

嗯,要根据检测品种来看的,例如中药的,就特别费柱子。  发表于 2017-10-11 16:20
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药徒
发表于 2017-10-12 08:27:14 | 显示全部楼层
氨基柱寿命本身就短,还有跟样品性质有关,你们是检测什么糖?
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