菌悬液的制备

meizi850818

比如我从0代开始，我新鲜培养物就是1代了，再将这1代的接到TSA/TSB上，再稀释，我就是用的2代菌了，对吗？
这样导致我冻存管里几乎就要控制在3代，新鲜培养物就是4代了这样到我稀释做菌悬液这步才正好在5代之内，我的理解对吗？菌种买的是笔样式的那种,2代的，现在想来估计做错了，2代的直接在TSA/SDA上传了一代，变三代，就转到生物珠的保藏管里-20度保存了，
用的时候直接取了一粒到生理盐水里稀释是不是就做错了，少了得到新鲜培养物的这一步

a72736650

进一次培养箱就相当于传了一代了 第一个问题对的。
新鲜培养物是第四代，可以直接挑取菌落制备菌悬液即可。还是四代
是的，没有新鲜培养物。  取用珠子培养出的是第四代的新鲜培养物然后制备菌悬液，还是第四代。     建议买0代冻干粉，冻存第二代。还有-20度也有点问题，要不要考虑液氮罐或者超低温冰箱？

meizi850818

a72736650 发表于 2017-8-21 16:19
进一次培养箱就相当于传了一代了 第一个问题对的。
新鲜培养物是第四代，可以直接挑取菌落制备菌悬液即可 ...

接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基中或胰酪大豆胨琼脂培养基上，接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30〜35°C培养18〜2 4小时；药典上这么说。


0代干粉，传代冻存第三代，3代冻存在生物瓷珠，-80度储存。从3代冻存管里复苏，新鲜培养物是第四代了，新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基中或胰酪大豆胨琼脂培养基上，接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30〜35°C培养18〜2 4小时，这句话的意思不是将4代的继续培养，用第五代的制备菌悬液吗？我的理解对吗

衷大大

代数的增加评判标准：是否经过新鲜培养基培养，每经过一次培养，代数增加一代。

meizi850818

衷大大 发表于 2017-8-22 18:16
代数的增加评判标准：是否经过新鲜培养基培养，每经过一次培养，代数增加一代。

那请问冻存的是三代的，你们是拿四代的新鲜培养物直接稀释，还是将四代的新鲜培养物再继续按药典所说接到相应的培养基，再稀释，我认为稀释的这一步是第五代了

a72736650

meizi850818 发表于 2017-8-22 17:55
接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基中或胰酪大豆胨琼脂 ...

这段话出自无菌检查法的培养基适用性检查。规定了要用新鲜培养物再传一次再制备菌液。跟后面微生物限度检查法的菌液制备规定略有不同。    照着做就是了。
我们冻存的第二代。  如果冻存第三代最后就是用第五代制备菌液，当然也没问题。

衷大大

meizi850818 发表于 2017-8-22 22:56
那请问冻存的是三代的，你们是拿四代的新鲜培养物直接稀释，还是将四代的新鲜培养物再继续按药典所说接到 ...

只要四代的是新鲜培养物就行，不能是直接从冰箱里拿出来用的

lin428

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