【HPLC异常问题及解决】异常1：不出峰以及峰面积非常小

北重楼 · 发表于 2016-12-6 08:42:47

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指南中对不出峰或者出峰极小列出了五方面的原因，见上面的表格中间一列，最右侧一列则是对应的处理方法。

概括起来这五个原因笔者觉得可以分两方面论述，一个是检测器相关的问题，一个样品或者流动相相关的问题。

检测器的问题包括检测器没有打开、检测器与积分仪或数据处理系统的物理连接断开以及检测器设置的错误。

检测器没有打开在高级一些的HPLC上已经是基本上不会存在了，设备的开机自检以及运行状态的监视足以发现这类问题，在老一些的设备上是可能会遇到的。笔者十多年关在用一款日本的HPLC时，就发生过很离奇的事情，在测试过程中不小心触碰了检测器的开关，将检测器给关了，从而导致不出峰的情况。好在那时是手工进样，及时发现，如果换成现在的自动进样模式，损失就要大了。所以设备的自动化程度越高，往往也会匹配上更强大的系统监视与自检功能，这一点在系统选型时就应该考虑。

物理连接的断开是另一个偶发事件，物理接口的设计通常是可以一定程度上防止发生物料连接的断开的，不过这倒是给了笔者一个提醒，对于一些多检测器的HPLC，记得方法里需要配置正确的检测器以及数据采集通道，方法的修改也应该限定特定的有经验的人去做，否则有可能产生设备配置这类的软问题导致的无法采集信号的情况。

第三个检测器方面的问题同样与检测器的设置有关系，包括衰减（Attenuation）及增益（Gain），必要时可以设置自动归零，这些专有名词有些烧脑，总而言之，这些配置应该在方法验证的过程中固定下来，形成文件，并且对方法进行权限修改上的管理，防止被误修改。

从样品和流动相的角度来看不出峰或者峰面积非常小的情况有两种可能：样品进样发生了错误和流动相跑空。

这两种情况倒还真的算是比较常见的错误，样品的标识如果不够清楚的话很容易发生这种情况，有的时候用记号笔在容量瓶上进行了标记，结果这些标记又被有机溶剂给去掉了，或者样品瓶的位置放错都有可能导致进样的错误。

至于流动相的跑空，也是比较容易发生的一件事情，尤其是当HPLC没有低位报警，或者流动相的量在系统中设置错误的情况，很多人可能会不大愿意去设置流动相的量，其实有的品牌的HPLC在这方面设计还是不错的，每次更换流动相的时候，在系统中输入对应的流动相的量，系统会根据流速与时间的累积，计算消耗的流动相的量，到了低位时还可以提示，不过启用这个功能的用户估计也不多吧，很多时候我们往往习惯于一些旧的做法，不愿意去改变……

感谢原文的作者：

转载于PharmaGMP

hzleiyu · 发表于 2016-12-6 08:59:04

谢谢分享

伊娃瓦力 · 发表于 2016-12-6 08:59:57

液相的都来学习以下

kan2009 · 发表于 2016-12-6 09:05:07

图是什么东西都掉了

youngzhou · 发表于 2016-12-6 10:17:29

不错的分享，谢谢！

静水蓝心 · 发表于 2016-12-6 12:17:04

没问题，帖子图片都可见

13808089579 · 发表于 2016-12-8 13:28:36

看不到图谱啊！！！！！！！！！！！！

zjcdlt · 发表于 2016-12-20 12:03:04

没有图~~~有些看不明白

【HPLC异常问题及解决】异常1：不出峰以及峰面积非常小

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