关于微生物限度检查法验证的一点疑问

燕长风2013

在2010年版中国药品检验标准操作规程中，微生物限度检查法中，9.2.1  供试品组  取最低稀释级的供试液，按每1ml供试液加入50～l00cfu试验菌，按菌落计数方法测定其菌数。平皿法计数时，取试验菌液、供试液各1ml分别注入平皿中，立即倾注琼脂培养基；薄膜过滤法计数时，取供试液2ml过滤，冲洗液冲洗，并在最后一次的冲洗液中加入试验菌。
问一下，薄膜过滤法计数时，取供试液2ml过滤，为什么要取2ml？

一路奔跑

。。。。平皿法计数时，取试验菌液、供试液各1ml分别注入平皿中，立即倾注琼脂培养基。你之前取的是菌液、供试液各1ml。要保持不变量。

jxtan

你不是两个滤筒的嘛？

巴西木

我对这个不精通，看看大侠的高见@曙光在前头 @可亲可爱  

燕长风2013

jxtan 发表于 2013-4-11 08:45
你不是两个滤筒的嘛？

不明白啊，怎么是两个滤筒？一种菌两份平行？

燕长风2013

巴西木 发表于 2013-4-11 10:46
我对这个不精通，看看大侠的高见@曙光在前头 @可亲可爱

期待两位高见，谢谢

燕长风2013

一路奔跑 发表于 2013-4-11 08:42
。。。。平皿法计数时，取试验菌液、供试液各1ml分别注入平皿中，立即倾注琼脂培养基。你之前取的是菌液、供 ...

平皿法是供试液、菌液各1ml，薄膜过滤法也应是供试液、菌液各1ml啊

杨曙光

没有具体操作过，但药典中的规定是：“菌种及菌液制备  同计数培养基的适用性检查。

验证方法  验证试验至少应进行3次独立的平行试验，并分别计算各试验菌每次试验的回收率。

(1)试验组  平皿法计数时，取试验可能用的最低稀释级供试液1ml和50～100cfu试验菌，分别注入平皿中，立即倾注琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，按平皿法测定其菌数。薄膜过滤法计数时，取规定量试验可能用的最低稀释级供试液，过滤，冲洗，在最后一次的冲洗液中加入50～100cfu试验菌，过滤，按薄膜过滤法测定其菌数。”
检查方法规定：“可取适宜稀释级的供试液1ml进行试验。用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或其他适宜的冲洗液冲洗滤膜，冲洗方法和冲洗量同“计数方法的验证”。”
综合以上两项规定我认为这里是笔误应该是：“薄膜过滤法计数时，取供试液1ml过滤，冲洗液冲洗，并在最后一次的冲洗液中加入试验菌。”
个人观点仅供参考

hongwei2000

道理非常简单，操作规程错了！（看一下药典你就知道了）
我曾经多次说过，千万不要把它当成红宝书！
其实它也就是一本指南，有时指南，有时也指北，不外是一些“专家”写的SOP而已。

zc3205

操作规程有误，见药典C:\Documents and Settings\Administrator\桌面

燕长风2013

谢谢各位，明白了，书中确实有很多错误

可亲可爱

以上各位都说得很清楚,我也不用说了.

lxiaof

由于需要用营养琼脂和玫瑰红钠琼脂培养基测细菌和霉菌、酵母菌总数，测量的标准均是取1ml检查。而薄膜过滤法时，一般操作是同时过滤两个滤筒，所以应将2ml供试液加入100ml稀释液中，再吸取稀释液进入两个滤筒。

molo

没有 “取供试液2ml过滤”这句话的
再翻翻药典核对一下吧

lxiaof

我说的是可选的检查方法，不是药典上内容。