峰面积逐渐变大RSD不过

十里星河

有关物质对照溶液中，有一种杂质峰面积逐渐变大，导致RSD不过，流动相之前是先提案PH再加有机，但是后面怀疑流动相配制错误，先加有机再调PH，后面做成功了，这次做按后面方法配制流动相，走出来的结果还是不行，峰面积还是变大

xsl19881106

1、RSD逐渐变大一般情况下与流动相关系不大，不应该先考虑流动相的问题。
2、首先考虑仪器准备充分和仪器本身的问题，如果仪器准备充分的前提下，看仪器有没有报错信息，有没有明显的压力波动，特别是明显瞬时的压力变动，如果没有需要考虑其他问题，如样品仓温度设置，温度设置比较低，溶液放置到样品仓之后随着时间的推移，进样小瓶里面溶液浓度会发现轻微的变化，可参考热胀冷缩原理，浓度相比会变高，意味着进样量相对变多，峰面积会偏高。还要考虑仪器本身的重现性问题，有的仪器是注射器定量，有的是定量环的，定量环一般重现性比较好，注射器定量重复性相对较差。
3、进样小瓶盖是否是预开口，是否会影响进样量的准确性。正常情况下，现在市面上需要根据具体用途选择预开口或不开口的小瓶盖。
4、样品溶液是否是高浓度有机相，如果在加上进样小瓶盖的预开口情况，进样小瓶的有机相是否存在挥发，如果挥发严重，会导致样品浓度相对变高，峰面积会变大。
5、另外需要考虑，一开始溶液配制时是否超声、混匀导致溶液温度偏高的情况，如有机相比例偏高，混匀一段时间后，溶液体积会明显变大，然后放置到样品仓后，温度会逐渐恢复到室温或样品仓问题，进样小瓶体积会逐步缩小，样品浓度会逐步提高，导致样品峰面积逐渐偏大。
上述情况可以了解一下，若能解决问题最好，不能解决可以作为原因排查的参考。

十里星河

xsl19881106 发表于 2024-11-21 18:36
1、RSD逐渐变大一般情况下与流动相关系不大，不应该先考虑流动相的问题。
2、首先考虑仪器准备充分和仪器 ...

流动相是PH5.0的磷酸盐缓冲液：乙腈（700：300）样品稀释剂是纯水，进样盘温度控温5℃，配制对照品的时候超声混匀了，但是我同事做了一次昨天，那个杂质峰峰面积逐渐变大，因为我上次做的没问题，今天我也做了一次，跟她昨天一样，同样的色谱柱，同样的检测方法，就是出现了这种情况，不知道哪步出问题了

xsl19881106

仪器厂家型号方便说一下吗？
另外，据我所知，某厂家的仪器不建议检测纯水稀释剂的样品，多次试验验证的结果，厂家也是这么建议。
目前来看，样品仓温度会有一定影响，另外进样小瓶中样品溶液不要太满，会导致相对负压，影响进样量准确性。

十里星河

xsl19881106 发表于 2024-11-21 19:09
仪器厂家型号方便说一下吗？
另外，据我所知，某厂家的仪器不建议检测纯水稀释剂的样品，多次试验验证的结 ...

安捷伦1260

十里星河

xsl19881106 发表于 2024-11-21 19:09
仪器厂家型号方便说一下吗？
另外，据我所知，某厂家的仪器不建议检测纯水稀释剂的样品，多次试验验证的结 ...

而且同样的，我上次做了没问题

xsl19881106

十里星河 发表于 2024-11-21 19:32
而且同样的，我上次做了没问题

你可以找厂家工程师咨询一下了，如果需要工程师联系方式，可以私聊给你

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微信d6ss82z3

题：有关物质对照溶液中，有一种杂质峰面积逐渐变大，导致RSD不过。疑惑点：有关物质对照溶液中有几个杂质，①如仅有一种且这个杂质的峰面积逐渐变大。-应考虑杂质的配制是否正常，应能保证有关物质对照溶液的稳定性。②如有关物质对照溶液有多种，仅有一种杂质的峰面积逐渐变大。-考虑这个杂质在此溶液体系中不稳定。

落幕灬

遇到过类似楼主的问题 当时做的一个基毒杂质，用的默认15℃控温进样盘，有时候还好，有时候就是逐渐减小或者变大，但是用其他型号没带控温的液相做出来的结果就是好的。后来问了工程师让我们改变一下进样盘的温度，没有特殊需求就跟室温保持一致比较好，调整到25就没发过这样的问题

机智鼠

在药学和医疗器械领域，色谱分析中峰面积的变化可能由多种因素引起。首先，根据《中国药典》2020版四部通则0511高效液相色谱法，流动相的配制顺序对分析结果有重要影响。您提到的情况可能是由于流动相配制不当导致的。

1. **流动相配制顺序**：通常建议先调节pH值至所需范围，再加入有机溶剂。这是因为pH值的调整可能会影响有机溶剂的溶解度和稳定性。《中国药典》2020版四部通则0511中提到，流动相的pH值应在规定范围内，且应保持稳定。

2. **杂质峰面积增大**：如果杂质峰面积逐渐变大，可能是由于样品降解、柱效下降或系统污染等原因。《中国药典》2020版四部通则0511要求，色谱柱应定期检查和维护，以确保分离效果。

3. **RSD（相对标准偏差）不过**：RSD是衡量数据精密度的一个指标，高RSD值表明实验重复性差。《中国药典》2020版四部通则0431统计分析方法指导原则指出，应确保实验条件的稳定性和操作的一致性。

综上所述，建议您重新检查流动相的配制顺序，确保按照正确的方法进行。同时，检查色谱柱的状态和系统的清洁度，以及样品的稳定性。如果问题依旧存在，可能需要进一步优化色谱条件或更换色谱柱。请参考《中国药典》相关条款进行操作。

【鼠鼠还在学习中，内容仅供参考（药搭GMP软件提供技术支持）】