液相色谱法

zhoudingch

咨询一下各位分析大佬，如果液相色谱法为梯度洗脱程序测定有关物质，但是数据采集时间，比梯度洗脱程序的时间短，这种方法能被接受吗？
如：      时间       流动相A     流动相B
               0             20             80
               15           30              70
               25            80             20
               35            80             20
在这种梯度条件下，运行时数据采集到25分的时候停止。
这种是否可以？
坐等大佬解惑！

白天的星星v2r

首先，只要数据采集没有问题，洗脱时间长点可以被其他方接受；
只是浪费自己的时间，如果基线比较好平衡，可以缩短梯度时长

流星c7o

理论上来说只要保证目标化合物和其相关的峰全被记录下来就没有问题，不过你这个洗脱程序是哪里来的，我们实验室的测定方法都有标准的操作规程，自己不能随意改动的·

chenszdz

要看具体情况，出于什么目的想缩短，杂质洗脱情况怎么样，是按SOP检验还是方法开发？还有说的数据采集时间是什么意思，主峰出峰时间吗？

416301116

从楼主设置的梯度方法看应当是不可以的。

说明原因之前，先说下楼主设置的方法存在的可能问题，如果楼主的方法为反相而不是反反相的话，%B应该随着洗脱时间比例越来越高，如果是反反相的话，那没什么问题。

接着说楼主说的问题，为什么不行，通常梯度方法的最后一个阶段时候来平衡到初始条件的，目的并不是为了检测，所以是可以不用采集的，可以参考欧洲药典的方法通常是不会给出最后一阶段的平衡程序的，因为死体积的差异所以需要使用者自行设置，所以这部分的数据并不关键，但在方法开发时应当予以采集以证明其已经充分平衡。但是楼主设置的方法比例25-35与初始条件完全不一致，所以应当被采集和记录，所以是没有合适的理由进行舍弃的。但保险起见，为了能够观察到平衡的有效性，以及数据如果出现异常时，可以协助判断，建议保留相应数据。

15857667220

可以啊，只要你们的数据采集时间保证杂质能完全被洗脱出来，方法是经过验证的，而且文件里要说明数据采集时间是多久，梯度洗脱时间是多久，但是一般审计老师看到这种就会问的，图谱一拿出来，运行时间比如是30分钟，数据采集时间是25分钟，那就有五分钟是没有数据的，要么就是图谱上只显示数据采集时间，于文件的梯度洗脱时间对不上，建议是把梯度洗脱时间与数据采集时间一致，如果你方法本身还需要冲洗时间，那可以把这个多出的冲洗时间设置为后运行时间，那图谱上后运行时间段是不显示的，只有数据采集时间

15857667220

单看你这个梯度程序应该是有问题的，最后都没有回到初始比例，那数据采集时间比35min还要早就结束啦？如果没有设置足够的平衡时间回到初始比例，那走下一针怎么走，就算序列下针走下去，比例也是不会的，保留时间应该对不上，除非走单针

zhoudingch

非常感谢各位解答，受教了

天蓝雪

可以看看仪器压力线 你到25分钟的时候 比例虽然跟初始比例一致，但是压力没稳定，这样的话，如果你平衡好仪器之后，连着进两针样品，你会发现两针的保留时间会不一致，但是第二针开始后面的保留时间又会变一致；正常你应该按表中梯度时间来，不过如果第一针是空白，不怕被人质疑的话，可以缩短时间；自己评估风险