药典1101的无菌检查所用的培养基是怎么验证的？

芋头j6u

1、无菌检查中用到硫乙醇酸盐流体培养基、胰酪大豆胨液体培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基；除了硫乙醇酸盐流体培养基、胰酪大豆胨液体培养基做了验证，剩余的胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基需要做验证吗？
2、如果以上几种培养基需要验证，是做培养基检查和灵敏度？如果需要做是怎么样做？同无菌检查中的硫乙醇酸盐流体培养基、胰酪大豆胨液体培养基一样？适宜的温度培养14天？
3、无菌检查的所用到培养基需要验证的依据是那个？
4、另外还有一个疑惑，菌种不能超过五代，我梯度稀释10-7才等到100cfu/ml是否不符合？
5、我确定好了菌种的梯度（100cfu/ml）是否需要鉴别菌种？如果鉴别参照那个法规？
6、初入行的小白，求大神讲解一下！！谢谢！！！


补充内容 (2024-11-6 15:27):

2、现如今还有一个疑惑，我在传代培养的过程中，选择用第三代作为原液来梯度稀释，从平板中挑一环去梯度稀释和用液体培养基中吸取1ml去稀释，同梯度培养出来的菌数是否有差异过大？固体培养基作为原液比较好还是？

机智鼠

您好，针对您的问题，我逐一解答如下：

1. 根据《中国药典》2015年版四部通则无菌检查法（附录XI H），所有用于无菌检查的培养基都需要进行验证。因此，胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖液体培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基也需要进行验证。

2. 对于这些培养基的验证，通常需要进行培养基检查和灵敏度测试。培养基检查主要是为了确保培养基本身是无菌的，而灵敏度测试则是通过添加已知量的微生物来评估培养基的检测能力。具体的操作步骤可以参考《中国药典》的相关章节或咨询专业的微生物实验室。

3. 无菌检查所用到的培养基需要验证的依据是《中国药典》2015年版四部通则无菌检查法（附录XI H）。

4. 关于菌种不能超过五代的问题，这主要是因为随着传代次数的增加，菌种可能会发生变异，导致其特性发生变化。如果您的梯度稀释达到了10^-7才得到100cfu/ml，这可能是由于菌种的特性或者实验条件导致的。建议您在实验过程中严格控制实验条件，并定期对菌种进行鉴定和保存。

5. 确定了菌种的梯度后，确实需要进行菌种的鉴别。具体的鉴别方法可以参考《中国药典》中的相关章节或其他权威的微生物学参考书籍。

希望以上解答能对您有所帮助！如有其他问题，请随时提问。

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1.无菌检查和微生物限度检查用到的培养基都需要做培养基适用性检查；
2.参考1101、1105、1106；
3.同2
4.菌种的代次和稀释没有关系，稀释不是传代
5.储备菌株和工作菌株需要做纯度和特性确认，稀释后的不做

爱茜茜里

10-7并不表示菌种到了第七代，是稀释倍数。
无菌检验所用的培养基都需要做培养基的适用性检查，和相关的灵敏度检查。

芋头j6u

机智鼠 发表于 2024-11-6 09:32
您好，针对您的问题，我逐一解答如下：

1. 根据《中国药典》2015年版四部通则无菌检查法（附录XI H），所 ...

收到，谢谢，您的解答，非常感谢

芋头j6u

zhcm17 发表于 2024-11-6 09:53
1.无菌检查和微生物限度检查用到的培养基都需要做培养基适用性检查；
2.参考1101、1105、1106；
3.同2

收到，谢谢您的解答！

芋头j6u

爱茜茜里 发表于 2024-11-6 10:45
10-7并不表示菌种到了第七代，是稀释倍数。
无菌检验所用的培养基都需要做培养基的适用性检查，和相关的灵 ...

收到，谢谢您的解答！

诺诺ヘ

从固体培养基挑一环到液体稀释确实会有误差，比较看手法了

或者你可以选择像甘油冻存管类型的保存方式，使用前加入液体培养基增菌复苏之后，再依据梯度稀释，菌数比较稳定