细胞培养问题求助

NOey65ju62

细胞培养时，在T瓶中，细胞分布呈线状，是什么原因？污染？摇匀方式不对？还是T瓶表面正电荷发布问题？有没有大佬知道

猫星人

细胞在T瓶中培养时呈现线状分布可能由几个因素引起，这里是一些可能的原因：

1.摇匀方式不对：如果摇晃或混匀细胞时不充分或方式不当，可能导致细胞不能均匀分布在培养基中，尤其是在T瓶这类宽口容器中更容易发生。细胞可能倾向于沿着液面的某些特定线路聚集，形成线状分布。

2.T瓶表面特性：T瓶内部表面的处理（如正电荷涂层）是为了增强细胞贴壁能力。如果这种涂层分布不均或者有局部异常，可能会引导细胞在某些区域特别偏好贴附，形成线状排列。此外，如果有微小的划痕或其他物理损伤，也可能影响细胞贴壁模式。

3.污染：虽然线状分布不一定直接指向污染，但特定类型的污染，比如支原体污染，并不会典型表现为细胞分布的改变，而是影响细胞生长状态和形态。不过，如果伴随其他污染迹象（如浑浊、颜色改变、生长异常），应考虑污染的可能性。

4.细胞特性：某些细胞类型可能自然倾向于特定的生长模式，特别是在二维培养环境中，细胞间的相互作用和贴壁偏好可能会导致线状排列，这与细胞本身的生物学特性有关。

5.培养条件：包括培养基成分、pH值、温度、CO2浓度等因素的改变也可能影响细胞的贴壁和分布情况。

解决这个问题，可以尝试以下方法：

调整摇匀技术，确保每次加入新培养基前后都充分而温和地摇匀T瓶。
1.检查T瓶表面是否有质量问题或特殊处理层是否均匀。
2.确认培养条件是否符合细胞最佳生长需求。
3.观察是否有污染迹象，必要时更换新的无菌培养基和T瓶重新接种细胞。
4.如果问题持续，考虑更换细胞株或咨询其他实验室是否有类似细胞培养的经验。
如果确定不是操作和技术问题，可能需要进一步的实验来探索细胞本身或培养环境的具体原因。

NOey65ju62

我是5瓶一起摇匀的，有3瓶正常，细胞和培养基也一样的，培养基也没有变浑浊之类的，就比较奇怪

猫星人

NOey65ju62 发表于 2024-6-4 16:49
我是5瓶一起摇匀的，有3瓶正常，细胞和培养基也一样的，培养基也没有变浑浊之类的，就比较奇怪

这样的话：可能的原因更倾向于特定的瓶子问题或细胞自身的行为差异；
如果这2个瓶子来自于不同的批次或供应商，它们的表面处理（如正电荷分布）可能存在细微差别，影响细胞的贴壁和分布模式。   细胞种群的不均一性：即使是在看似均一的细胞悬液中，也有可能存在细胞亚群，这些亚群可能对培养条件或瓶壁的反应不同，导致在某些瓶中表现出特殊的生长模式。

陈平安1

按理来说，悬浮的细胞不会出现这样的情况，即使没摇匀，也不会啊，我之前出现过一次这种问题，是因为所用培养基可能没有复温，太冷的缘故，细胞不知道是因为出现应激反应还是什么原因，在皿里面呈现波纹

Haoim1

环境振动？