《金币》胸腺肽（胸腺法新）活性测试

HQL123 · 发表于 2024-4-15 09:01:27

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本帖最后由 HQL123 于 2024-4-15 09:05 编辑

大家有做过胸腺肽（胸腺法新）活性测试的吗？我们用小鼠脾淋巴细胞，用10ug刀豆蛋白刺激细胞6h，测蛋白没有结果，也不知道那个环节出问题了，反反复复做过很多轮了，现在很迷茫，看文献都是感觉很简单就做出来了，我们一次没有出来过曲线，有没有过来人，帮忙指点一下，不胜感激。

鬼使神差 · 发表于 2024-4-15 09:12:02

洗洗jio，刺激一下灵感，快速进入工作状态

[发金币]帖的汇总帖，定期更新
https://www.ouryao.com/forum.php ... &fromuid=938791
(出处: 蒲公英 - 制药技术的传播者 GMP理论的实践者)

琦瑞福生 · 发表于 2024-4-15 09:12:08

没做过，但是对你很熟悉，最近去了吗

琦瑞福生 · 发表于 2024-4-15 09:13:12

怎么个事

琦瑞福生 · 发表于 2024-4-15 09:13:43

过分了啊

秋刀鱼什么味 · 发表于 2024-4-15 09:19:18

洗洗jio，放松一下，找找灵感

光脚大象 · 发表于 2024-4-15 09:32:46

来学习一下...........

HQL123 · 发表于 2024-4-15 10:30:46

现在金币贴都不行了吗？

爱上了土豆 · 发表于 2024-4-15 11:01:05

emmm，不知道

luobitao · 发表于 2024-4-17 10:41:22

谢谢分享！

luobitao · 发表于 2024-4-17 10:41:55

来学习一下...........

luobitao · 发表于 2024-4-17 10:44:37

来学习一下...........

zhjf · 发表于 2024-4-22 13:10:14

来学习一下.

zhjf · 发表于 2024-4-28 16:30:03

进来学习学习

歪说歪有李 · 发表于 2024-4-28 22:32:14

哎，主要在淋巴细胞能不能收集到，调整或核实下离心液的配方/密度

Lily_VIP · 发表于 2024-4-29 08:49:03

这是网上搜出来得结果：你参考一下
细胞活力：首先确认所分离的脾淋巴细胞的活力是否足够高。低活力的细胞可能无法有效响应刺激。使用台盼蓝排斥实验或其他细胞活力检测方法来评估细胞的初始活力。
细胞数量与培养条件：检查使用的细胞数量是否恰当，过少或过多的细胞数量都可能影响实验结果。同时，确保培养基、温度、CO2浓度等培养条件符合细胞生长的要求。
刀豆蛋白A的浓度与纯度：10μg/mL是一个常用的浓度，但根据不同的细胞类型和实验需求，这个浓度可能需要调整。确认Con A的批次和纯度，因为不同批次或供应商的试剂可能表现不同。
刺激时间：6小时的刺激时间对于某些实验可能是合适的，但对于其他实验可能太短或太长。根据文献或前期实验优化刺激时间。
检测方法：确认所采用的检测蛋白质表达或细胞活性的方法是否灵敏且适合此实验设计。例如，如果使用ELISA检测IL-2或其他细胞因子，要确保抗体的特异性和灵敏度，以及操作步骤的准确性。
细胞预处理：在加入Con A之前，是否对细胞进行了适当的预处理？有时，预处理步骤（如洗涤、FBS饥饿等）对于获得良好的结果至关重要。
对照组设置：设立合适的对照组非常重要，包括未处理的细胞对照、只加药物（胸腺肽）不加Con A的对照以及只加Con A不加药物的对照，以排除非特异性反应或确认Con A的有效性。
胸腺肽的浓度与质量：确认胸腺肽的浓度选择是否合理，以及其来源和质量是否可靠。不同浓度的胸腺肽可能对细胞有不同的效应。
操作技术：实验过程中是否存在交叉污染或操作失误，比如在处理样本时是否有误操作导致样品损失或污染。

HQL123 · 发表于 2024-4-29 09:37:08

Lily_VIP 发表于 2024-4-29 08:49
这是网上搜出来得结果：你参考一下
细胞活力：首先确认所分离的脾淋巴细胞的活力是否足够高。低活力的细胞 ...

谢谢！！！

HQL123 · 发表于 2024-4-29 09:37:46

歪说歪有李发表于 2024-4-28 22:32
哎，主要在淋巴细胞能不能收集到，调整或核实下离心液的配方/密度

谢谢！！！

地球球长 · 发表于 2024-6-25 21:59:30

N年前刚毕业时就做这个，早忘记怎么做了。当时不合格也要求做合格，果断跑路

鬼使神差 · 发表于 2024-6-25 22:12:06

竟然没领到金币

[质量检验] 《金币》胸腺肽（胸腺法新）活性测试

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