小于100cfu的菌悬液怎么做

今晚煮芝麻汤圆 · 发表于 2024-4-10 10:13:07

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稀释到10-9画平板出来还是好多

章鱼哥123 · 发表于 2024-4-10 10:21:45

应该是稀释的不到位，正常到10的负8次方，已经小于100cfu了

今晚煮芝麻汤圆 · 发表于 2024-4-10 10:31:40

章鱼哥123 发表于 2024-4-10 10:21
应该是稀释的不到位，正常到10的负8次方，已经小于100cfu了

第2代平板，我取了半环金黄色葡萄球菌放入100ml的胰酪大豆胨液体培养24h，然后取1ml菌液在氯化钠蛋白胨9ml，稀释到10-9，倒平板还是好多，我哪一步错了吗？

今晚煮芝麻汤圆 · 发表于 2024-4-10 10:32:56

章鱼哥123 发表于 2024-4-10 10:21
应该是稀释的不到位，正常到10的负8次方，已经小于100cfu了

标准菌种含菌量是1*10的8次方cfu/瓶，新手没人教只能自己摸索

火舞精灵 · 发表于 2024-4-10 10:34:25

你这不是一般的牛啊一般能稀释到7次方都了不得了，你这9次方还很多

wzzz2008 · 发表于 2024-4-10 10:37:20

今晚煮芝麻汤圆发表于 2024-4-10 10:31
第2代平板，我取了半环金黄色葡萄球菌放入100ml的胰酪大豆胨液体培养24h，然后取1ml菌液在氯化钠蛋白胨9m ...

取1ml加9ml，这个不是-9，是-1吧？

今晚煮芝麻汤圆 · 发表于 2024-4-10 10:38:49

火舞精灵发表于 2024-4-10 10:34
你这不是一般的牛啊一般能稀释到7次方都了不得了，你这9次方还很多

所以想不到我是哪一步错

今晚煮芝麻汤圆 · 发表于 2024-4-10 10:40:11

wzzz2008 发表于 2024-4-10 10:37
取1ml加9ml，这个不是-9，是-1吧？

1ml菌胰酪大豆胨液，加进有9ml的氯化钠里不就是10的负一然后梯度倒

今晚煮芝麻汤圆 · 发表于 2024-4-10 10:42:20

有人给我指点一下我从第二代开始做怎么才能做出小于100cfu的菌吗

火舞精灵 · 发表于 2024-4-10 10:43:20

今晚煮芝麻汤圆发表于 2024-4-10 10:38
所以想不到我是哪一步错

从斜面接种到液体培养基中，液体培养基的量和培养时间要控制，一般最短时间就足够了（细菌18，真菌24），时间越长浓度越高，10倍稀释的过程中每稀释一个梯度都要更换一根刻度吸管，最后一个梯度计数的时候0.1ml到计数平皿上，按规定的最短时间培养，你再试试。

今晚煮芝麻汤圆 · 发表于 2024-4-10 10:48:25

火舞精灵发表于 2024-4-10 10:43
从斜面接种到液体培养基中，液体培养基的量和培养时间要控制，一般最短时间就足够了（细菌18，真菌24）， ...

涂平板吗?我都有更换，涂平板我试过，10的负9出来也有100以上

火舞精灵 · 发表于 2024-4-10 10:51:07

本帖最后由火舞精灵于 2024-4-10 10:52 编辑

今晚煮芝麻汤圆发表于 2024-4-10 10:48
涂平板吗?我都有更换，涂平板我试过，10的负9出来也有100以上

那就多总结吧，早晚会摸索出来的。如果一直是10的负9都超100，那就中间一个稀释过程取0.5ml，计数就下来了

依然星期三 · 发表于 2024-4-10 10:52:13

买商品化的定量菌株吧

今晚煮芝麻汤圆 · 发表于 2024-4-10 10:54:03

依然星期三发表于 2024-4-10 10:52
买商品化的定量菌株吧

老板觉得成本大，不同意

逸清草堂 · 发表于 2024-4-10 11:05:30

多搞几遍就好了

wsx · 发表于 2024-4-10 11:12:53

今晚煮芝麻汤圆发表于 2024-4-10 10:31
第2代平板，我取了半环金黄色葡萄球菌放入100ml的胰酪大豆胨液体培养24h，然后取1ml菌液在氯化钠蛋白胨9m ...

那么就取四分之一环，如果还多，再取少些。

沉默是输 · 发表于 2024-4-10 11:16:07

微生物实验想做好是不能速成的
稀释到-9浓度还很大的话就继续稀释看看
实在不行重新做开始少挑一些
这玩意做熟了就知道每次挑多少大概稀释多少倍能到100cfu

阿国 · 发表于 2024-4-10 11:45:21

测菌浓度了吗

章鱼哥123 · 发表于 2024-4-10 13:34:54

今晚煮芝麻汤圆发表于 2024-4-10 10:31
第2代平板，我取了半环金黄色葡萄球菌放入100ml的胰酪大豆胨液体培养24h，然后取1ml菌液在氯化钠蛋白胨9m ...

每次用涡旋震荡仪来混匀菌液，替代移液枪手动吹动稀释

今晚煮芝麻汤圆 · 发表于 2024-4-10 13:43:19

阿国发表于 2024-4-10 11:45
测菌浓度了吗

没有，不懂怎么测

[方法验证及确认] 小于100cfu的菌悬液怎么做