【谱新杯】细胞分选技术之Macs磁性分选技术

大输液的小兵

细胞分选技术之Macs磁性分选技术

    谈到细胞分离、细胞分选方法目前有常用的方法有两种流式细胞分选和磁性细胞分选，但不论是何种分选方式。在前期会有使用许多物理学的分离方法，对特定的细胞群体进行分离，比如说过滤、裂解、贴壁以及基于密度梯度离心等操作。由于这些“粗糙”的物理操作不能够实现对特异的细胞群体进行精确的区分。但是它们能为我们现在的细胞分选提供一个前期的样本处理的过程。

    MACS(Magnet-Activated Cell Sorting ),与FACS(Fluorescence-Activated Cell Sorting )这两种分选技术是相辅相成的各有优势的分选技术，说到具体的特定细胞群体的分离，我们不得不提到广为所知的流式细胞分选，也就FACS(Fluorescence-Activated Cell Sorting )，流式的分选技术最大的优势在于多标记物的鉴定分选。但是流式细胞分选还是有一定的“准入门槛”的，首先你要拥有一台流式细胞分选仪，同时分选的相关操作人员，需要特定的培训，有一定的基础才能胜任。

    MACS(Magnet-Activated Cell Sorting )磁性细胞分选，而对于这项分选技术，如果是应用于特别稀少的细胞群体，当我们需要花费相当长的时间才能拿到一定数量的细胞时，磁性细胞分选就比较方便、灵活、易上手。准入门槛也比较低，也不需要投资大量的设备，所以可以根据具体的实验需求的具体的情况进行选择和组合。

    下面主要给大家介绍一下磁性细胞分选，这项技术是利用可识别并结合细胞表面抗原的纳米含铁微珠，也就是通常大家所说的磁珠，在超强的一个磁场分离柱当中滞留，实现细胞分离的技术。对于初始的细胞样品针对其特异性进行标记，标记好的细胞样品进行上样，进入带有磁场分离柱当中进行磁性分离，如果您的目标细胞是滞留在磁场中的细胞的话，就可将分离柱移出磁场，然后进行洗脱，这就完成了整个细胞分选的全部过程，所以说易上手。

    磁性分选技术有几个核心的步骤组成的，首先是需要识别目的细胞表面标记物的“磁珠”有了这个“磁珠”，我们还需一个分离柱，对于分离柱这一块我们需要把结合了磁珠的细胞样品上样到分离柱当中，磁场就需要一个外加的磁场来源，就是分离器，几个重大的核心元件有了，还需要一个支撑架对我们整个分离系统做一个移定的支撑。

    在细胞分选不是特别熟悉的同学可能在听到一些词汇如阳选、阴选、分离、富集、去除、超标、间标等等很多。这些词汇到底指什么，其实说这些词汇都是用来描述细胞分离整个过程的，但是也可以分一下类，比如说阳选和阴选所指的是标记策略的不同，分离、富集、去除是对于此次进行细胞分选的操作目的不同，对于一定的细胞是想把它留住把它富集还是把它去除，这上你操作的目的，直标和间标更多是一个对标记物的结构的描述。

    阴选和阳选是针对阴性组分和阳性组分来讲的，使用了磁珠对细胞群进行了标记，它如果得到标记并滞留在磁场当中的，我们认为它就是阳性组分，那些没有得到磁珠标记的流穿的细胞组分我们叫阴性组分。如果你采用的细胞分选方法让阳性组合滞留在磁场当中就是阳选，反之则为阴性选择。

    选择合适的分选策略至关重要，基于获得的目标细胞群纯度和回收率，我们当然期望分选后的目标细胞的纯度比率越高越好，为了要得到高质量的细胞群，需要前期做一些准备。需要了解一下目的细胞是否有明确的独特的表面标记物，如果没有则直接选择阴性分离的方法。如果有明确的表面标记物，还要解一下起始样本所含目的细胞是强必表达还是弱阳性表达，起始细胞样品是的含目的细胞的频度及含量。充分的了解了这些情况才能做出一个合理的风险策略的制定，对于分选结果是至关重要的。

   阳性选择是最广泛验证的、灵活有效的方法，理论上来讲只有目的明确的细胞表面标记物，我们都可以用细胞阳性选择的方法识别抓取，在非常极端的情况下，比如非常稀的的细胞、弱表达的细胞表面标记物、充分彻底去除特定细胞群都应考虑阳性分选。

    阴性分选有两种情况是适合采用的，目的细胞无明确的标记物、需要进行二次磁性分选的（顺序分离）。

    本文仅是笔者对于细胞分选的一点粗糙的理解，还希望广大蒲友多多批评指正。        

蒲公英征文组

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