高效液相色谱法

暖暖有点甜° · 发表于 2020-5-27 15:32:23

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高效液相色谱法测定含量的时候，液相是梯度洗脱的，A是0.4%的磷酸溶液B是乙腈，走对照品的时候第一针是21分钟出峰，第二针五分钟就出峰了，两个峰的峰面积差不多，后面所有样品出峰时间都在五分钟左右，本人也是刚学习做液相没多久，不知道是什么原因。希望懂得多的人能给点可以参考的原因

梦清歌 · 发表于 2020-5-27 18:03:23

色谱峰延迟主要可能的原因：1、色谱柱柱温，2、系统存在气泡，可看压力曲线，3、梯度方法可能存在程序bug，4、其他未知因素，比如起初流动相A或B管道口有个未在液面下，建议楼主排查一下仪器，柱子方面的问题。

lhd000000 · 发表于 2020-5-27 17:06:07

做的是什么品种，平常对照出峰的时间是多少分钟

暖暖有点甜° · 发表于 2020-5-27 16:58:27

火舞精灵发表于 2020-5-27 15:46
色谱柱或系统堵了，而且是你做这次样品前一次用的流动相中含盐，没有维护好导致析盐，本次进第一针样品时把 ...

前一次流动相甲醇-水-冰醋酸50-50-1，而且每次做完都会洗柱子的

piaopiaohu003 · 发表于 2020-5-27 16:29:31

液相色谱测定的时候，通常需要采集系统压力，这是判断故障的逻辑基础，对照之前是否有进空白样品，通过各样品压力和色谱图判断系统是否异常；均正常的情况下再进对照，通过对照的保留时间和峰面积的RSD值来判断系统适用性，楼主给的信息太少，没法准确判断故障所在，仅供参考。

火舞精灵 · 发表于 2020-5-27 15:46:27

色谱柱或系统堵了，而且是你做这次样品前一次用的流动相中含盐，没有维护好导致析盐，本次进第一针样品时把盐溶解了，出峰靠后的原因是单向阀内析盐影响了实际流量。

胜利者 · 发表于 2020-5-28 11:52:30

流动相的梯度异常

刘文彬 · 发表于 2020-5-29 09:08:32

楼主描述不清晰，五分钟后面是否有峰，如果没有峰，那么可能剃度设置最后平衡时间不充分，导致样品被高浓度乙腈冲出，五分钟刚好一个柱体积（常规柱子），仅供参考。

飞鱼123456 · 发表于 2020-5-29 16:42:13

leiopixie · 发表于 2020-5-29 17:55:14

最大可能性，有个峰在第一针没流出，需要到下一针流出

金金金金金金1 · 发表于 2020-5-29 21:43:29

梯度洗脱完成，没有设置平衡程序，无法进行批处理！

依然星期三 · 发表于 2020-5-30 07:38:29

平衡时间不够，上一针的残留锋吧

hongyu · 发表于 2020-5-30 07:56:41

看一下对照品出峰时间，比对一下

angelma123 · 发表于 2020-5-30 08:04:51

后面都是5分钟出峰，估计是一开始系统还没平衡吧，进样之前先走空白确定系统是否充分平衡吧

大旗 · 发表于 2020-5-31 16:22:32

梯度洗脱没有设置回原始梯度

unsg · 发表于 2020-5-31 18:07:29

我觉得是你仪器没充好并且平衡时间太短，这个仪器上一个流动相用的是什么？

刘文彬 · 发表于 2020-6-3 17:46:30

学习学习

[质量控制QC] 高效液相色谱法