准确度试验细节讨论

沉默的疯子

背景：检测原料中残留溶剂GC法直接进样检测。
对照溶液配置：取正庚烷50mg到100ml容量瓶中，NMP溶解定容得储备液。取5ml到50ml量瓶中，NMP定容得对照品溶液。
供试品溶液配置：取样品500mg到10ml容量瓶中，NMP溶解定容。
实验室现在准确度加标溶液配置：
方法1、取样品500mg，置10ml量瓶中，加入储备液1ml，NMP溶解定容。
方法2、取样品500mg，置10ml量瓶中，加入对照品溶液溶解定容。
现在关于这两种方式产生了分歧，希望大家从试验方法科学得角度阐述一下，哪种方式更合理，以及原因。
谢谢。

wyyalih

你的限度标准是多少？按定量限，限度标准和150%限度配制三种溶液，也就是加样溶液中目标物的浓度为定量限浓度，限度标准的浓度和150%限度标准的浓度，不建议只使用一种溶液，个人建议，欢迎指正

hoitkey

个人认为，方法1定量移取更加准确

剑魔

该指标的验证一般以回收率试验来进行，试验设计需考虑在规定范围内，制备 3 个不同浓度的样品（包含杂质的LOQ和规格的120%），各测定 3 次，即测定 9 次，报告已知加入量的回收率（％）或测定结果平均值与真实值之差及其可信限。

剑魔

wyyalih 发表于 2019-1-9 08:05
你的限度标准是多少？按定量限，限度标准和150%限度配制三种溶液，也就是加样溶液中目标物的浓度为定量限浓 ...

三个浓度，每个浓度各检测三次，就是150%浓度的标准是从哪个指南或标准里面描述的吗？

wyyalih

剑魔 发表于 2019-1-9 09:36
三个浓度，每个浓度各检测三次，就是150%浓度的标准是从哪个指南或标准里面描述的吗？

这个没有硬性规定，使用120%可能比较常见，国内GMP指南也是含量推荐用150%，实际需要做到多大浓度是从考虑产品的质量波动的风险出发的，150%可能更加保险，假如某溶媒的残留限度是100ppm，由于种种原因，会不会实际会超过100ppm，达到120ppm、150ppm

悠睬湫罅

个人认为，第一种方式更加准确，但是两种方式的结果不会有太大影响

沉默的疯子

悠睬湫罅 发表于 2019-1-9 16:50
个人认为，第一种方式更加准确，但是两种方式的结果不会有太大影响

因为要带新人，所以最近正好遇到了，我自己也没有一个很好的解释。所以想从理论上分析一下两种的优缺点和各自会引入什么样的误差。

沉默的疯子

hoitkey 发表于 2019-1-9 08:41
个人认为，方法1定量移取更加准确

能阐述一下你的理由吗？因为带新人，遇到了这个问题。

沉默的疯子

wyyalih 发表于 2019-1-9 08:05
你的限度标准是多少？按定量限，限度标准和150%限度配制三种溶液，也就是加样溶液中目标物的浓度为定量限浓 ...

我的限度是0.5%，当然我的加入量，我同意你的观点。但是在实际加入过程中该选择哪种方式呢？

沉默的疯子

剑魔 发表于 2019-1-9 09:33
该指标的验证一般以回收率试验来进行，试验设计需考虑在规定范围内，制备 3 个不同浓度的样品（包含杂质的L ...

所以在加入的时候哪一种方式会合理，或者两种加入方式的优缺点是什么呢？

剑魔

沉默的疯子 发表于 2019-01-10 18:52
所以在加入的时候哪一种方式会合理，或者两种加入方式的优缺点是什么呢？

两种都不符合指南要求

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hoitkey

沉默的疯子 发表于 2019-1-10 18:40
能阐述一下你的理由吗？因为带新人，遇到了这个问题。

你把方法2中用对照品进行定容，改成称500mg，置10ml容量瓶中，加对照品溶液10ml溶解，你看看是不是在容量瓶的刻度附近？会不会有偏离？偏离程度如何?

沉默的疯子

剑魔 发表于 2019-1-10 20:23
两种都不符合指南要求

那么怎么做才是更符合指南要求的方式呢？

沉默的疯子

hoitkey 发表于 2019-1-11 08:27
你把方法2中用对照品进行定容，改成称500mg，置10ml容量瓶中，加对照品溶液10ml溶解，你看看是不是在容量 ...

会超过刻度线，具体量的话倒是没有量

hoitkey

沉默的疯子 发表于 2019-1-11 12:36
会超过刻度线，具体量的话倒是没有量

是不是证明，加了样品，你的溶液体积会发生变化？是不是浓度也就变化了？
按你方法2定容，其实你加了不到10ml的对照品溶液，却可以定容到10ml是不是？对照品浓度是不是变化了？虽然这个变化是微小的，但是，在讨论那个方法更好的情况下，我会选择方法1。个人意见

沉默的疯子

hoitkey 发表于 2019-1-11 13:37
是不是证明，加了样品，你的溶液体积会发生变化？是不是浓度也就变化了？
按你方法2定容，其实你加了不 ...

好的，谢谢提出的意见。

wyyalih

沉默的疯子 发表于 2019-1-10 18:50
我的限度是0.5%，当然我的加入量，我同意你的观点。但是在实际加入过程中该选择哪种方式呢？

限度为0.5%，那验证的三个浓度应为定量限浓度，100%浓度也就是0.5%浓度和0.75%浓度（按150%限度算），或者使用100%浓度6次（但不建议这样做），你算算加对照品后样品浓度是多少？即使不考虑样品中目标物的量，只考虑对照品，如果使用第一种方法，目标物的浓度已经达到10倍的限度，不知道你实际产品的结果是不是能达到如此高的波动，如果没有这么高，做这个浓度的意义是什么，另外此浓度下还会不会成线性？

gdg661837

这两种有什么不一样？无非是加的浓度不一样罢了。
上面的人说的很好了。就是加定量限、限度、限度150%。中外药典都是这样建议的。具体没空给你找了。
你供试品浓度定多少的？你的残留限度是多少的。自己算吧。说的很清楚了。

gdg661837

剑魔 发表于 2019-1-9 09:36
三个浓度，每个浓度各检测三次，就是150%浓度的标准是从哪个指南或标准里面描述的吗？

中国药典