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[无菌&限度检查] 枯草芽孢杆菌菌悬液

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药徒
发表于 2017-2-21 12:25:55 | 显示全部楼层 |阅读模式

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实验中发现枯草芽孢杆菌浓菌液不便于保存,制备斜面又不利于操作,每周都传代不是很现实。然后呢就考虑到制备枯草芽孢杆菌孢子悬液,但是由于以前SOP里并无规定,也没试验验证过存放效期的问题,所以计划进行验证,考虑到存活率、形态及鉴定以及活性等方面,还有其他方面需要考虑吗?其次有什么支持性材料?如果我使用了孢子悬液除了验证和改sop还需要做哪些工作?敬请大家不吝赐教。
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药徒
发表于 2017-10-10 10:30:23 | 显示全部楼层
美国药典中规定可以制成枯草芽孢悬液,但是中国药典没有说明。枯草芽孢悬液很稳定
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药徒
发表于 2017-12-18 17:02:44 | 显示全部楼层
juanx 发表于 2017-10-10 10:30
美国药典中规定可以制成枯草芽孢悬液,但是中国药典没有说明。枯草芽孢悬液很稳定

  请问一下,枯草芽孢杆菌菌悬液贮存期限验证的问题。
  药典规定通则1105枯草芽孢杆菌培养时间是18~24小时,这样得到的其实大部分是繁殖体,衰亡会比较快,前期的菌量很不稳定。要想得到较多的芽孢应该培养时间久一点。然后药典通则1201对枯草芽孢杆菌菌悬液的制备有详细的规定“取枯草芽孢杆菌CCMCC(B)63 501〕的营养琼脂斜面培养物,接种于盛有营养琼脂培养基的培养瓶中,在35〜37°C培养7日,用革兰染色法涂片镜检,应有芽孢85%以上。用灭菌水将芽孢洗下,在65℃加热30分钟,备用。”不知道我可不可以用通则1201的这个方法制备芽孢杆菌菌悬液,然后验证他的贮存期限?但是用这个方法枯草的培养时间和培养基就不符合通则1105的要求了,这样是不是有背通则1105的要求呢?
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药徒
发表于 2017-12-19 08:22:39 | 显示全部楼层
百花开 发表于 2017-12-18 17:02
请问一下,枯草芽孢杆菌菌悬液贮存期限验证的问题。
  药典规定通则1105枯草芽孢杆菌培养时间是18~24 ...

谢谢!1201还真没注意过,要好好读读药典
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药徒
发表于 2017-12-19 10:16:15 | 显示全部楼层
juanx 发表于 2017-12-19 08:22
谢谢!1201还真没注意过,要好好读读药典

大家一起学习
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药徒
发表于 2018-1-15 15:29:54 | 显示全部楼层
现在 都2018年了,枯草芽孢杆菌你搞定了吗
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药徒
 楼主| 发表于 2018-1-16 21:23:08 | 显示全部楼层
dk521 发表于 2018-1-15 15:29
现在 都2018年了,枯草芽孢杆菌你搞定了吗

搞定了
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药徒
发表于 2018-1-17 08:59:25 | 显示全部楼层

我不信,你发给我看看
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药徒
 楼主| 发表于 2018-1-17 23:49:07 | 显示全部楼层
dk521 发表于 2018-1-17 08:59
我不信,你发给我看看

为什么给你看?用前就用新鲜菌液吧。
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药徒
发表于 2018-1-23 08:47:12 | 显示全部楼层
我准备 枯草芽孢杆菌菌液 甘油管-30度冷冻,有效期大概一年 每次适用 进行TSB 复苏,培养18到24小时,稀释一定倍数适用。
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药徒
 楼主| 发表于 2018-1-24 19:43:27 | 显示全部楼层
dk521 发表于 2018-1-23 08:47
我准备 枯草芽孢杆菌菌液 甘油管-30度冷冻,有效期大概一年 每次适用 进行TSB 复苏,培养18到24小时,稀释 ...

可行。磁珠更好。
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