自身对照溶液无法重现

zhanglianlian

请教各位老师：我现在检测一个原料药样品有关物质，用自身对照法。杂质限度是单杂＜0.5%，总杂＜1.5%，自身对照溶液是将供试溶液稀释100倍。有两个问题：
（1）供试品溶液稀释100倍后，主峰峰面积不成比例，按照峰面积计算，实际倍数为130左右。不同批次之间实际倍数差异较大，从120-180都有。
（2）用同一个供试品溶液，稀释4份平行样，峰面积相差较大，导致最终计算结果差异较大。
请各位帮忙分析一下，谢谢！
下面两个人分别操作得到的数据[img=0,1]file:///C:\Users\jszx11\AppData\Roaming\Tencent\Users\418383643\QQ\WinTemp\RichOle\YT3G2[RQFC(Y4LD3]8Q_T`7.png[/img]。数据均为自身对照溶液主峰面积，并且是从同一个供试品溶液量取1ml并稀释100倍得到的。①②③④分别代表4个平行样，3个①表示该样品重复进样3次。

[img]file:///C:\Users\jszx11\AppData\Roaming\Tencent\Users\418383643\QQ\WinTemp\RichOle\YT3G2[RQFC(Y4LD3]8Q_T`7.png[/img]

[img]file:///C:\Users\jszx11\AppData\Roaming\Tencent\Users\418383643\QQ\WinTemp\RichOle\YT3G2[RQFC(Y4LD3]8Q_T`7.png[/img]

可亲可爱

考虑可能存在以下几方面问题：1、稀释后是否在定量限以内。2、样品的稳定性。3、人员操作问题。

zysx01234

溶液浓度越稀，稳定性可能会下降，当然进样的峰面积影响也会越大。另外，仪器运行时间久了，系统的条件会有点变化的，比如环境温度变化，柱温也略有变化等。

A人的数据至少比B人的好一点。当然，稀释的移液操作还是比较讲究的，虽然都是移1.0ml到100ml，但是误差的累计就会扩大。貌似这一项的RSD允许误差也是比较大吧，RSD≤5.0%？10.0%？15.0%？

zhanglianlian

可亲可爱 发表于 2016-11-21 14:20
考虑可能存在以下几方面问题：1、稀释后是否在定量限以内。2、样品的稳定性。3、人员操作问题。

1、定量限正准备考察，不过自身对照溶液主峰峰高在5左右，峰面积在50左右（安捷伦设备），推测浓度是高于定量限的。
2、供试品溶液是考察过稳定性的，主峰面积几乎没有变化。只有6-7min有一个小杂质持续增长。自身对照溶液是没有考察过稳定性的。
3、样品复测过3次（共3批样品），还进行过一次平行样考察。不同批次之间，样品平行样之间都会出现这种情况，我觉得人员操作有误的几率比较小。

哈里巴人

可以提高样品及対照液浓度试试，或者加大进样量

hongwei2000

高低浓度不成比例是属于正常现象
否则就不需要自身对照法了

hongwei2000

但你数据差太多了
是仪器的问题、样品的问题、还是人的问题