培养基PH问题

15982499701 · 发表于 2016-6-30 22:43:28

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灭菌后的培养基PH怎么测？如果不在规定范围，怎样保证在无菌条件下进行调节呢？特别是固体培养基。我们都是分装后灭菌的，真要每瓶调，工程有点大。能不能通过验证呢？

tiantiancw · 发表于 2016-7-25 14:46:08

高连海发表于 2016-7-23 11:38
再怎么验证也还是要测灭菌后的，不然无法说服审计专家的。至少要不定时确认，你不能保证你得人员百分百 ...

你说的有道理，但是测灭菌后，会带来很多问题。第一，如果每瓶开封测PH，那么必然会造成污染。第二，如果选定测几瓶，如何选定具有代表性？依据是什么，装载方式怎么做？第三，如果灭菌后测，那等培养基冷却至25度需要很多时间，尤其是多批次多锅次的情况下。我们做过很多培养基验证，只要配制方法和灭菌参数不变，灭菌前和灭菌后浮动一般在0.2内

最后一根腿毛 · 发表于 2016-7-1 07:10:30

一般不会不在范围内，购买的干粉培养基，按照说明书去配制，问题不大。实在不放心，把ph调高0.1-0.2

Doitasyoulike · 发表于 2016-7-1 08:30:06

通常不会调，如果pH不合格，就是干粉出问题了

00ttt22 · 发表于 2016-7-1 08:30:37

我非常同意你的观点，送朵鲜花鼓励一下

无为 · 发表于 2016-7-1 08:46:38

买设备

tiantiancw · 发表于 2016-7-1 09:09:11

我们是通过验证，证明在按规定程序进行配制、灭菌且装载方式也一样的情况下，灭菌后PH的变化是可控且一致的，然后每次只在配制的时候测PH即可。

a72736650 · 发表于 2016-7-1 10:09:59

干粉培养基按照说明配制基本没问题自己称量琼脂粉蛋白胨等等材料配制的话，加水溶解后最好调高一点ph值（0.1~0.2），因为灭菌后ph会降低。

规定的ph值是25摄氏度时的测量值你需要买一个平面电极。。当然也不贵不过是耗材哦记得一次多买几根

凝砂 · 发表于 2016-7-21 22:55:00

楼主，我也想问这个问题，有时间咱俩交流交流

高连海 · 发表于 2016-7-23 11:36:08

一呢，要保证你得配制器具符合要求，每次的称量量等稳定，尽可能用洁净的玻璃容器。其次呢，咨询厂家他们怎么做的，再就是灭菌前后他们培养基pH是升的还是降得，变化幅度是多少。如果存在灭菌后不合格的状况，再排除制备方法和灭菌程序及人为因素后，可以做验证，建议验证的时候也要考虑促生长能力是否发生了变化。

高连海 · 发表于 2016-7-23 11:38:22

tiantiancw 发表于 2016-7-1 09:09
我们是通过验证，证明在按规定程序进行配制、灭菌且装载方式也一样的情况下，灭菌后PH的变化是可控且一致的 ...

再怎么验证也还是要测灭菌后的，不然无法说服审计专家的。至少要不定时确认，你不能保证你得人员百分百做到按照验证的程序来做，其次介质啊器具页会变化的不是。

一米2015 · 发表于 2016-7-24 13:47:50

a72736650 发表于 2016-7-1 10:09
干粉培养基按照说明配制基本没问题自己称量琼脂粉蛋白胨等等材料配制的话，加水溶解后最好调高一点ph ...

平面电极多少钱啊，一般

snowflower · 发表于 2016-7-26 22:26:32

灭菌前和后分别测量pH，灭菌后只能选择代表性测量。如果灭菌和配置条件稳定，时间长了自会摸索出规律。

高连海 · 发表于 2016-7-29 07:19:46

tiantiancw 发表于 2016-7-25 14:46
你说的有道理，但是测灭菌后，会带来很多问题。第一，如果每瓶开封测PH，那么必然会造成污染。第二，如果 ...

1.初始验证的时候随机选择多瓶，证明你结果的稳定均一，实际上是同一批差别真没多大；2.测量时可以分装到试管等方式解决；3.大家实验都做了而且发现的规律都差不多，做个验证说明我们做了，该考虑的考虑了也有采取措施，那么可以了。虽然需要追求完美，可是也要一步一步来，能力有限啊。

高连海 · 发表于 2016-7-29 07:29:33

tiantiancw 发表于 2016-7-25 14:46
你说的有道理，但是测灭菌后，会带来很多问题。第一，如果每瓶开封测PH，那么必然会造成污染。第二，如果 ...

关于装载方式，由于产品等较为稳定我们每次配的量都固定了，所以装载就一定了

。验证灭菌柜时就验证了，而且灭菌温度分布可以作为代表性的依据之一，其次制备方法等明确也是一个依据吗。实在要全部打开来那就滚犊子吧。促生长也不是每瓶都做也没人要依据。过程可控，人员培训合格素质到位，原料稳定，可以了。再过分全世界的药厂得倒闭大半。玩过火了。

joshua · 发表于 2016-7-29 07:41:59

tiantiancw 发表于 2016-7-25 14:46
你说的有道理，但是测灭菌后，会带来很多问题。第一，如果每瓶开封测PH，那么必然会造成污染。第二，如果 ...

1/2、一般就随机抽一瓶测pH 代表当次灭菌的那一批

3、这个和实验习惯有关系，国内很多实验室都是什么时候要做实验了，临时配相应量的培养基，这样导致了每灭菌批次做适用性实验基本不可能；国外实验室一般一次配1~2个月的用量，所以每批做适用性工作量也不是很大

生物培养基 · 发表于 2016-7-29 08:44:40

把ph调高0.1-0.2　　　灭菌后会影响ｐｈ　的变化的，　　要不您这边试试日水那个培养基。　　个人认为感觉挺好的。　　

巳已己 · 发表于 2016-7-29 09:49:54

现在的培养基都是现成的，不用怎么配吧

[检验及监测] 培养基PH问题

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