关于液相进行有关物质检测的系统适用性问题的请教

云中之马

各位老师好，关于液相进行有关物质检测的系统适用性想请教一下。
    我们该品种的有关物质采用的是自身对照法进行检验，那自身对照法的有关物质检查是否需要进5针的重复性符合规定？
15版药典上重复性仅规定了外标法和内标法；那自身对照法也需5针重复性么？

zysx01234

我找找看之前的检验规程，找到了告诉你，找不到也没有办法

云中之马

zysx01234 发表于 2016-5-9 09:34
我找找看之前的检验规程，找到了告诉你，找不到也没有办法

谢谢，老师

zysx01234

请问有几个杂质，难道都没有对照品吗

zysx01234

我看了一下好几个产品的有关物质检测，基本是待系统稳定后依次进空白1真，对照1针，供试品1针的

3.6有关物质（HPLC）：

1）色谱条件：同含量测定项下。

2）溶液的配制：

供试品溶液：称取100mg供试品于100mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。

对照溶液的配制：准确移取1mL供试品溶液于一100mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀；

3）待仪器系统稳定后，依次进样空白（流动相）、对照溶液、供试品溶液各一针，并记录色谱图，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.9倍（0.9%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的1.9倍（1.9%）。供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积0.05倍（0.05%）的峰可忽略不计。按下式计算最大单一杂质和总杂质的含量：

	最大单一杂质%=		Ai×1.0
			Ab
总杂质%=		∑Ai×1.0
		Ab

其中，Ai为供试品溶液图谱中，最大单一杂质峰面积响应值；

∑Ai为供试品溶液图谱中，单一杂质峰面积响应值之和；

Ab为对照溶液图谱中主峰面积响应值。

zysx01234

下面列举一个有几个已知和未知的杂质：

相关物质（HPLC）：
1）色谱条件
仪器：配有紫外检测器的高效液相色谱仪。
色谱柱： Diamonsil，5μm，4.6×150mm的不锈钢柱；
检测波长：UV254nm；      流速：1.0mL/min；      进样量：10μL；
缓冲液：0.25mL磷酸加到300mL水中，混合，过滤，脱气；
流动相：缓冲液∶乙腈=21∶79；
样品稀释液：缓冲液∶乙腈=30∶70；
运行时间：主峰保留时间的5倍。
2）溶液配制：
供试品溶液：称取约50mg供试品于10mL容量瓶中，用样品稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀。
对照溶液a：将5mg杂质B溶解于1.0mL供试品溶液中，用样品稀释液稀释至50mL。
对照溶液b：称取约5mg杂质A于一50mL容量瓶中，用样品稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀。移取1.0mL该溶液和1.0mL对照溶液a，用样品稀释液稀释至10mL ，摇匀。
对照溶液c：称取约50.0mg杂质C于一100mL容量瓶中，用样品稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀。
3）操作步骤：待仪器系统稳定后，依次进样1针样品稀释液空白、1针对照溶液a 、1针对照溶液b、1针对照溶液c 、1针供试品溶液并记录色谱图。要求进对照溶液a中，杂质B和供试品主峰的分离度R≥3.5，杂质A的峰面积不得大于对照溶液b中相应峰的峰面积（0.2%）；杂质B的峰面积不得大于对照溶液b中相应峰的峰面积（0.2%）；杂质C、D都不得大于对照溶液b中供试品主峰的峰面积（0.2%）；对于任何一个杂质，都不得大于对照溶液b中供试品主峰的峰面积（0.20%）；所有杂质峰面积之和不得大于对照溶液b中供试品主峰峰面积的2.5倍（0.5%）；忽略限度：对照溶液b中供试品主峰的峰面积的0.25倍（0.05%）。按下式计算各相关物质的含量：

杂质A%=        Aa×0.2
        Aas
杂质B%=        Ab×0.2
        Abs
任一其它杂质%=        Ai×Ki×0.2
        As


总杂质%=        ∑Ai×Ki×0.2        +杂质A%+杂质B%
        As        
其中，Aa、Ab、Ai分别为供试品溶液图谱中杂质A、杂质B、其他单一杂质峰面积响应值；
Ki为校正因子，对于杂质C，Ki=1.9；对于其他杂质，Ki=1；
∑Ai供试品溶液图谱中为除杂质A杂质B之外的所有其他单一杂质峰面积响应值之和；
      Aas、Abs、As为对照溶液b图谱中，杂质A、杂质B、主峰面积响应值。
各已知杂质的保留时间、相对保留时间：
名称        保留时间        相对保留时间
杂质A        约2.0min        0.53
杂质B         约2.9min        0.74
杂质C        约2.6min        0.66
杂质D        约10.9min        2.82
供试品主峰约3.4min        1.00
未知杂质        ----        ----
注：杂质A、B、C、D分别为XXX、YYY、ZZZZ、EEEEE。

汉字太少

你目前要做的是“重复性试验”，重复性试验要求“用至少测定6份的结果进行评价；或设计3种不同浓度，每种浓度分别制备3份供试品溶液进行测定，用9份样品的测定结果进行评价。”不知道说的对不对。
15版药典没发现哪个位置“重复性仅规定了外标法和内标法”还请教一下

云中之马

zysx01234 发表于 2016-5-9 09:49
下面列举一个有几个已知和未知的杂质：

相关物质（HPLC）：

谢谢，老师。我们有关物质自身对照一直也是不需要进标准5针的。

云中之马

汉字太少 发表于 2016-5-9 09:55
你目前要做的是“重复性试验”，重复性试验要求“用至少测定6份的结果进行评价；或设计3种不同浓度，每种浓 ...

15版药典高效液相色谱法，系统适用性中的重复性

zysx01234

一般情况下，有关物质的测定是在单纯的含量或纯度测定之后，色谱条件基本相当，因此系统适应性没有问题。

汉字太少

云中之马 发表于 2016-5-9 11:29
15版药典高效液相色谱法，系统适用性中的重复性

看到了

liangliangliu12

好好学习一下，谢谢

NPi0Vv7ZY9

zysx01234 发表于 2016-5-9 09:43
我看了一下好几个产品的有关物质检测，基本是待系统稳定后依次进空白1真，对照1针，供试品1针的
3.6有 ...

我也来好好学习，天天向上！