求微生物限度、无菌、内毒素的区别与联系

呼吸

微生物检测基本就这3项了。
微生物限度：用营养琼脂、玫瑰红钠培养。洁净度中等操作台内进行（B级)
无菌：硫乙醇酸盐、改良马丁在无菌套筒里操作并培养。洁净度要求较高(A级）
内毒素：鲎试剂稀释不同浓度来判定。洁净度要求不高，D级情况下即可。
我的理解微生物泛指细菌和霉菌酵母菌等等、应该是包罗万象，各种杂菌都有
无菌则也是各种杂菌与微生物限度检测的微生物有什么区别？
内毒素是一种热源，服用没什么关系，在注射后容易导致人体发热。内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种成分，叫做脂多糖。脂多糖对宿主是有毒性的。内毒素只有当细菌死亡溶解或用人工方法破坏菌细胞后才释放出来，所以叫做内毒素。耐高温
比如说注射液产品用气接触产品，他应该用滤器过滤其他吧。用膜直径改用0.45（过滤）的好还是0.22（除菌）的好？滤膜泡点肯定要做的，高风险产品应该要最少2层滤膜吧。用了这滤膜可以不用检这3项还是要检其中项目？而且有的企业只是一年验证一下，不对气体日常可行吗？
求大神详解3者的联系与区别，各什么时候需要检这3项及为什么。

红茶.

微生物限度针对非无菌产品
无菌和内毒素针对无菌产品。

lxiaof

微生物限度，无菌检验，内毒素检验均为供试品安全性检测。主要区别是微生物限度，无菌检验是检验活的微生物方法，内毒素检验可以检验死去的微生物中内毒素含量。
什么时候选用不同的检验方法，主要参见药典要求，例如口服制剂选择微生物限度，注射剂和眼用制剂选择无菌检验，注射剂也需要做内毒素检验。选择不同实验方法主要依据是供试品生物风险级别和供试品用途。
例如纯化水检验中不需做内毒素实验，注射用水检验中不需做无菌实验。依据是纯化水主要用途为清洗，注射用水用途是配液，所以注射用水的微生物风险更高，需要做内毒素实验，控制风险。
微生物限度和无菌实验用具要求无菌，内毒素实验用具要求去除内毒素。
检验环境要求
现行药典微生物限度和无菌实验均是C级下局部A级，微生物限度在超净工作台，无菌实验在生物安全柜内操作。也可以选择D级下隔离系统中操作。
内毒素实验对环境无要求，在普通操作台上操作即可。

呼吸

lxiaof 发表于 2015-5-4 09:15
微生物限度，无菌检验，内毒素检验均为供试品安全性检测。主要区别是微生物限度，无菌检验是检验活的微生物 ...

比如说注射液产品用气接触产品，他应该用滤器过滤其他吧。用膜直径改用0.45（过滤）的好还是0.22（除菌）的好？滤膜泡点肯定要做的，高风险产品应该要最少2层滤膜吧。用了这滤膜可以不用检这3项还是要检其中项目？而且有的企业只是一年验证一下，不对气体日常可行吗？

呼吸

lxiaof 发表于 2015-5-4 09:15
微生物限度，无菌检验，内毒素检验均为供试品安全性检测。主要区别是微生物限度，无菌检验是检验活的微生物 ...

微生物和无菌检测的区别还是不清楚。除了培养基和方法之外。

lxiaof

呼吸 发表于 2015-5-4 09:42
微生物和无菌检测的区别还是不清楚。除了培养基和方法之外。

给药途径是口服，允许有一定量的微生物存在，人体可以抵御外来微生物影响，消化道里环境可以杀死大量的微生物。但是控制菌是不能存在的。
给药途径是注射液，药品将直接在血液中起作用，药品中如果存在外来微生物，带来的风险大于口服制剂。无菌检验不同于限度检查，不再是以微生物数量为判断标准，而是以微生物生长与否来判断。
两种检验除了培养基和检验方法不同外。设计实验也有不同。
微生物限度实验，计数实验每个梯度计数需做两个或多个平板，计数取平均值。不需要同时做阳性对照和阴性对照。实验结果超标，可以复试。
微生物限度实验，控制菌检查需要增菌培养，不需要重复，需要同时做阳性对照和阴性对照。实验结果呈阳性，经调查不是实验室原因，不允许复试，直接发不合格报告。
无菌检查，生物药品和化学药品有不同的规定。生物药品需将硫乙醇酸盐培养基分成两个温度培养，化学药品硫乙醇酸盐培养基只需要做一个温度培养。同时需要做阳性对照和阴性对照。不需要增菌培养。。实验结果呈阳性，经调查不是实验室原因，不允许复试，直接发不合格报告。
微生物限度实验和无菌实验的取样量也是不一样的，可参加药典。

lxiaof

呼吸 发表于 2015-5-4 09:25
比如说注射液产品用气接触产品，他应该用滤器过滤其他吧。用膜直径改用0.45（过滤）的好还是0.22（除菌） ...

公用介质中的压缩气体过滤使用滤芯，0.45为初级过滤孔径，0.22为次级过滤孔径。一般为两级过滤。滤膜（芯）完整性测试时是每次生产前后都需要检测的。
压缩气体的检验不需要日常检验，但需要定期检测，和水系统一样，需要制定监控点和监控周期。监控周期无法规强制要求，由企业自定。
压缩气体的检测可以参见国标。如果是出口产品，可以直接见相关药典下个论要求。

呼吸

lxiaof 发表于 2015-5-4 14:21
给药途径是口服，允许有一定量的微生物存在，人体可以抵御外来微生物影响，消化道里环境可以杀死大量的微 ...

微生物限度需要做阴性对照，至于阳性对照是已经对培养基适应性检测（其实就是阳性对照）。微生物没有复试的概念。

jinfang150890

楼上都回答得挺好。。。