黄连含量测定

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有没有老师做过黄连含量测定，请指教：
药典中黄连含量测定方法如下：

味连  照高效液相色谱法（《中国药典》2015年版通则0512）测定

6.1色谱条件与系统适用性试验

    以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈－0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（50：50）（每100ml中加十二烷基硫酸钠0.4g，再以磷酸调节pH值为4.0）为流动相，检测波长为345nm，理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于5000。

6.2对照品溶液的制备

    取齐盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含90.5μg的溶液，即得。

6.3供试品溶液的制备　

　　取本品粉末（过二号筛）约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-盐酸（100:1）的混合溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

6.4 测定法    分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，以盐酸小檗碱对照品的峰面积为对照，分别计算小檗碱、表小檗碱、黄连碱和巴马汀的含量，用待测成分色谱峰与盐酸小檗碱色谱峰的相对保留时间确定。

    表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱的峰位，其相对保留时间应在规定值的±5%范围之内，即得。相对保留时间见下表：

带测成分（峰）	相对保留时间
表小檗碱	0.71
黄连碱	0.78
巴马汀	0.91
小檗碱	1.00

6.5 本品按干燥品计算，以盐酸小檗碱（C20H18CINO4）计，含小檗碱（C20H17NO4）不得少于5.5%，表小檗碱（C20H17NO4）不得少于0.80%，黄连碱（C19H13NO4）不得少于1.6%，巴马汀（C21H21NO4）不得少于1.5%。

现多次检测结果均是黄连碱、巴马汀相对保留时间均在标准下限，表小檗碱相对保留时间不在标准规定的0.71±5%的范围内，低于了下限。请教各位大咖，遇到过同样的现象没有，该如何解决。

TheShowfbr

我们学校开这个实验也有这个问题

wjsd604

我做也是保留时间都超范围了，没想到办法，只能按顺序推测，流动相平衡了4h

boomer

今天做了黄连，想请问一下，黄连后面的表小檗碱、黄连碱和巴马汀的含量经常做出来不合格的，有没什么原因导致的啊？