高效液相色谱法检测动物抗生素—硫酸头孢喹肟的残留

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头孢喹肟化学式C23H24N6O5S2，是一种西药制剂，头孢类抗生素，抗菌谱广，抗菌活性强，多用于牛猪兽皮下注射，生物利用度较高并且毒性较低，在可食性组织中的残留量有检测要求。微源实验室查阅文献实验了一种以头孢喹肟的原形药为残留标志物，固相萃取-高效液相色谱测定头孢喹肟的方法。

准确称取24.21mg硫酸头孢喹肟标准品于100mL容量瓶中，用流动相溶解并定容，密封，4℃保存得到200μg•mL－1标准储备液。将所选鸡的皮肤和脂肪肝脏、肾脏组织剪碎放置在于匀浆机中，以10000r•min－1匀浆操作后分装。精密称取2g鸡组织置于离心管中，加入6mL提取液，涡旋充分混匀，300r•min－1振荡20min，10000r•min－1离心。取上清液于新的离心管中，加入6mL提取液重复操作一遍，将2次的上清液合并后加入6mL正己烷放入摇床振荡15min，然后离心10min，取底部澄清液体，过SPE柱。过柱时流速控制在每秒1滴左右。待提取液流干后，加入超纯水、1mL5％乙腈水淋洗柱子。待淋洗液流干后将SPE柱真空抽干，最后用6mL50％乙腈水洗脱，再将SPE柱抽干，收集洗脱液于10mL刻度试管中，氮气吹至干燥，最后用1mL流动相复溶涡旋，离心10min，使用0.22μm针筒式滤膜过滤，得到滤液待进样分析。色谱条件如下：

色谱柱	C18色谱柱(4.6μm×250mm)
流动相	量取90mL乙腈，与900mL超纯水充分混匀，用甲酸调pH至3.0，0.45μm微孔滤膜过滤，超声脱气
流速	1.0mL•min－1
检测波长	270nm
柱温	30℃
进样量	20μL

将空白匀浆组织称取6组每组各2g，加入标准溶液，使各头孢喹肟含量(X)分别为0.02、0.05、0.10、0.20、0.50、1.00、2.00μg•g－1，进行样品前处理并依据色谱测定方法进样，记录色谱图，得峰面积，每个浓度重复5次，以平均峰面积(y)对平均含量(x)回归，分别得出不同组织样品药物浓度的标准曲线和回归方程。按照色谱条件得到色谱图杂质峰相对较少且易于与目的峰分离，在0.03-2.00μg•g－1范围内，平均回收率为86％-88％，回收率较高。相关系数R2大于0.999，线性关系良好。利用固相萃取一高效液相色谱测定方法残留检测的精确度高，准确性和重现性好，符合残留检测的要求。

山东渊邦

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山东渊邦 发表于 2021-10-27 18:16