药典3301支原体检查法

LJYHHH

求助 药典关于支原体检查法描述不是很详细，我也是第一次做，网上也查不到什么资料，对于培养法和DNA染色法有一些问题，请老师指点
培养法
1.培养基是按照药典配方自行配制还是自行购买呢？自行购买的话，在后面培养基的使用中补加小牛血清时比例仍然和药典一致吗？
2.培养基灵敏度检查时，肺炎支原体和口腔支原体每次都需购买还是第一次购买后续保种留用？
3.支原体半流体培养基和琼脂培养基两者选一，通常选用哪个？
4.供试品接种之前需要做哪些处理？
5.“取每支装量为10ml的支原体液体培养基各4支，相应的支原体半流体培养基各2支（已冷却至36℃±1℃），每支培养基接种供试品0.5～1.0ml，置36℃±1℃培养21天。

于接种后的第7天从4支支原体液体培养基中各取2支进行次代培养，每支培养基分别转种至相应的支原体半流体培养基及支原体液体培养基各2支，置36℃±1℃培养21天，每隔3天观察1次

   次代培养时间是初代培养的第7天，用时间来确定次代培养的转种时间是不是不够严谨，是否需要结合培养状态，例如培养基时间等等？另外，次代培养之后初代培养的培养基是否仍需观察，观察意义是什么？

6.阴性对照和阳性对照品是什么?

有没有大佬帮忙解答呀

琳小妞

碎灬訫 发表于 2021-7-15 08:29
只能回答前面四个哈：
1，自行购买的成品液体培养基中看是否有牛血清成分和比例情况，没有的话，都是要加 ...

老师您好，请教一下，支原体药典培养法建立初期的方法学验证怎么做呢？

碎灬訫

只能回答前面四个哈：
1，自行购买的成品液体培养基中看是否有牛血清成分和比例情况，没有的话，都是要加血清的
2、购买菌种可以传代分装保存进行使用
3、二选一即可，通常选半流体
4、供试品的处理情况参照方法确认中的样品处理情况。

15109840646

培养法，我们是直接购买的培养基，要四种培养基哦，含精氨酸和不含精氨酸的肉汤和半流，我们用的胎牛血清，灭活后加入配比量青霉素钠，加于培养基中使用

无云007

@歪把子 来活了

LJYHHH

无云007 发表于 2021-7-14 07:52
@歪把子 来活了

哈哈哈坐等大佬

LJYHHH

碎灬訫 发表于 2021-7-15 08:29
只能回答前面四个哈：
1，自行购买的成品液体培养基中看是否有牛血清成分和比例情况，没有的话，都是要加 ...

非常感谢 赞赞赞

15109840646

已经取了传代样的原接种管弃掉

janhone

同问，字数补丁

sunbrust

碎灬訫 发表于 2021-7-15 08:29
只能回答前面四个哈：
1，自行购买的成品液体培养基中看是否有牛血清成分和比例情况，没有的话，都是要加 ...

加青霉素多少

sunbrust

15109840646 发表于 2021-8-29 19:43
培养法，我们是直接购买的培养基，要四种培养基哦，含精氨酸和不含精氨酸的肉汤和半流，我们用的胎牛血清， ...

药典没说加多少青霉素

还是那场雨

sunbrust 发表于 2022-4-24 15:01
药典没说加多少青霉素

我们是按照培养体积的1%。

sunbrust

还是那场雨 发表于 2022-5-31 08:57
我们是按照培养体积的1%。

我问厂家了，可以不加

luyijiangnan

15109840646 发表于 2021-8-29 19:43
培养法，我们是直接购买的培养基，要四种培养基哦，含精氨酸和不含精氨酸的肉汤和半流，我们用的胎牛血清， ...

想请教一下灵敏度试验需要每个批次的培养基都做么？

无往不利

草田生命株式会社：一家专门针对支原体检测及支原体相关技术服务的公司。针对USP和JP中支原体检测法：直接和间接培养法中订制出专用预制液体培养基及细胞配套解决方案。有需要的朋友可私信我[Respect]微信号： heqing2812