微生物方法验证

蜗牛菇娘XM

最近遇到一个样品本身具有抗菌性，想先采用薄膜过滤法消除抑菌性
问题1:按15版计数方法验证我是应该和平皿法一样先制备好含小于100cfu每毫升的实验组过滤，然后冲洗，还是应该再最后一次冲洗时再加入菌液呢？
问题2:如果薄膜过滤法不能消除抑菌性那么中和剂该怎么选择，以及量怎么定呢？

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lilian2007177

1、先在供试液里加菌，然后过滤、冲洗；如果回收率不合格，再考虑在最后一次冲洗液里加菌，即需要说明试验菌跟随供试液一起会失败，才能在最后冲洗液里加菌；
2、薄膜过滤法不能消除的话建议你咨询API的供应商，他们一般都摸索好了方法，或者根据抑菌物质的结构选择常用的中和剂来试验，中和剂的量是需要通过梯度试验来确定的，跟冲洗量一样，300ml、500ml、慢慢往上加，中和剂也是从少往多了加。

蜗牛菇娘XM

lilian2007177 发表于 2019-10-05 09:02
1、先在供试液里加菌，然后过滤、冲洗；如果回收率不合格，再考虑在最后一次冲洗液里加菌，即需要说明试验菌跟随供试液一起会失败，才能在最后冲洗液里加菌；
2、薄膜过滤法不能消除的话建议你咨询API的供应商，他们一般都摸索好了方法，或者根据抑菌物质的结构选择常用的中和剂来试验，中和剂的量是需要通过梯度试验来确定的，跟冲洗量一样，300ml、500ml、慢慢往上加，中和剂也是从少往多了加。

谢谢！明白了，再请教一下过滤的量一般是1g样品，就相当于1:10供试液10ml，那我是不是直接用99的供试液加1ml菌液，制备成含菌量小于100cfu的实验组，再去10ml加入适量稀释液中过滤，冲洗。最后的一张膜的量就是1g的含菌量是么？也就是供试品组如果说10ml过滤冲洗培养长了10个菌，就报告为10cfu/g。我的理解是不是对的呢？

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845052704

微生物限度方法学验证是要做三批吗，有没有文件规定

yuanyi58

我们薄膜过滤法是这样报告菌落数的 ，不知道其他厂家是怎么报告的