ELISA空白对照

hangzhouhdjy

根据质检报告所说，Substrate Blank vs.H2O合格标准为<0.100(OD值)，检测结果是0.009。是指两者的比值吗？另外，最终结果是否要减去所有的空白？操作过程如下：酶标板已经包被了一道抗体，直接加入样品和标准品、再加二道抗体、摇床振荡、洗版、加TMB显色、加终止液、读板。
试剂盒成分如下：包被好的酶标板、标准品、浓缩洗板液、二抗、TMB、终止液。
我需要每一步都单独检测试剂盒内各种成分的OD值作为各自的空白（本底），以便计算最终样品的OD值吗？


请大神不吝赐教，万分感谢！@cnosema

herozxq

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cnosema

是否要减去空白？
严格意义上说，最好所有孔的读数减去空白孔读数。但是不减的话，应该影响不大，反正整个测定的读数是整体平移。

空白本底
你可以设定几个孔作为空白本底，加样品/标准品的那个步骤，加入洗板液，其它的步骤正常。二抗，TMB，终止液正常加入。