【HPLC异常问题及解决】异常6：拖尾峰

北重楼

其实说实话，没有完全搞清楚今天贴的两张图有什么区别，从峰型上看都是拖尾峰，区别在于前一个异常强调是初始的进样和后续的进样。

从表述上来看，拖尾可能的原因是样品溶液会发生反应（里面用的单词叫Active Sites有些不大能理解具体是什么含义），对于这种情况，往往需要采用一些标样溶液进行系统的测试，如果同样标样是正常的，那就需要在溶液中加入一些离子对试剂进行调节；

同样的，流动相的pH不正确也会导致峰的拖尾，对于碱性的组份而言，通常较低的流动相pH值可以提供一个较好的对称峰型；同样，如果样品是被溶解在了强极性的溶剂而不是溶解在流动相中，有时候也会导致峰的拖尾。

污染也会导致峰的拖尾，污染可能的情况包括色谱柱或者保护柱的污染，也可以是流动相的污染，这两种污染的情况在昨天的异常5：分离度差或者峰型分裂中已经分析过了，不再赘述。


最后一种导致拖尾的情况是相邻的峰之间的相互干扰，这种情况下，往往系统是没有问题的，系统的异常可以通过标样的进样来排除。

在网上找到了一篇同样讲脱尾的文章，推荐给大家，可以通过底部的阅读原文去查看。

高效液相色谱仪分析中色谱峰拖尾的原因有色谱柱被污染、柱外死体积、样品过载、样品溶剂过强、组分共流出、流动相pH值在样品pKa附近和填料表面惰性不好等。

一、色谱柱被污染：

如果色谱柱开始使用时峰形正常，使用一段时间后逐渐出现峰拖尾，则色谱柱被污染的可能性很大。这时需要对色谱柱加强冲洗，即使用比方法流动相更强的溶剂冲洗色谱柱。

建议做好样品前处理，但如果前处理后依然比较脏，强烈建议配置保护柱。一旦峰形变差，柱效下降，应及时更换保护柱芯。

二、柱外死体积：

较大的柱外死体积会导致峰形展宽和峰拖尾，建议仔细检查样品经过的所有管路和各连接部位，使用合适的管线和接头。

三、样品过载：

减小进样体积或稀释样品。

四、样品溶剂过强：

样品溶剂强度应不高于流动相洗脱强度。最好使用流动相溶解样品或使用比初始比例流动相洗脱能力更弱的溶剂溶解样品。

五、组分共流出：

如果一小峰包含在一大峰的后面，需要做好色谱条件的优化，有条件时可利用PDAD检查峰纯度。

六、流动相pH值在样品pKa附近：

流动相pH值在样品pKa附近时，样品解离平衡不充分，容易出现前沿峰或拖尾峰，所以流动相pH值应尽量选在样品pKa±1.5以外。

七、填料表面惰性不好：

键合硅胶型填料表面的残留硅羟基或金属杂质易与待测化合物发生二次作用而导致拖尾。

建议：

1、选用高纯硅胶合成填料的色谱柱和进行了有效硅羟基封端填料的色谱柱。

2、降低流动相pH值，抑制硅羟基解离。

3、流动相中添加减尾剂，如三乙胺。

4、使用不同的有机溶剂。



感谢原文的作者：





转载于PharmaGMP

hzleiyu

谢谢分享

静水蓝心

可以当做培训资料

北重楼

静水蓝心 发表于 2016-12-6 12:13
可以当做培训资料

的确可以