胰脂肪酶的检测

绿叶清流

今天做了胰脂肪酶活性的检测，检测过程PH很难控制，控制时间长检测不准确。而且出现了空白实验消耗的氢氧化钠体积大于供试品的，这是怎么回事啊？

咕咕

这个没做过，看看几位做过没。@fsyylf @仲夏秋夜云 @vabs @hongwei2000  

绿叶清流

咕咕 发表于 2014-2-25 21:06
这个没做过，看看几位做过没。@fsyylf @仲夏秋夜云 @vabs @hongwei2000

非常感谢啊！

咕咕

绿叶清流 发表于 2014-2-25 21:15
非常感谢啊！

共同学习

孙艳红

咕咕 发表于 2014-2-25 21:06
这个没做过，看看几位做过没。@fsyylf @仲夏秋夜云 @vabs @hongwei2000

我们也没做过

歪说歪有李

楼上，是检验胰酶吗？@绿叶清流

仲夏秋夜云

一般就是水浴的时候反应过度了

hongwei2000

你把检验方法给帖出来
才好帮你分析可能性

绿叶清流

vabs 发表于 2014-2-26 08:35
楼上，是检验胰酶吗？@绿叶清流

嗯哪！现在有三种说法，不知道那个到底是正确的。加完供试品之后，第一种说法是边保温反应边滴加氢氧化钠使pH保持在9.0，10分钟结束反应，记录氢氧化钠的体积；第二种是边保温反应边滴加氢氧化钠使pH保持在9.0，10分钟后再在常温环境滴加氢氧化钠直到不再降低，记录氢氧化钠的体积；第三种是保温反应10分钟之后再滴加氢氧化钠直到pH不再变，记录氢氧化钠的体积。真是不知道到底哪一种是正确的的。

绿叶清流

hongwei2000 发表于 2014-2-26 11:36
你把检验方法给帖出来
才好帮你分析可能性

2010版药典的848页的检验方法。前边肯定没有问题，现在的问题主要是加完供试品之后的方法有异议，从而导致结果有问题。现在有三种说法，不知道那个到底是正确的。加完供试品之后，第一种说法是边保温反应边滴加氢氧化钠使pH保持在9.0，10分钟结束反应，记录氢氧化钠的体积；第二种是边保温反应边滴加氢氧化钠使pH保持在9.0，10分钟后再在常温环境滴加氢氧化钠直到不再降低，记录氢氧化钠的体积；第三种是保温反应10分钟之后再滴加氢氧化钠直到pH不再变，记录氢氧化钠的体积。真是不知道到底哪一种是正确的的。

绿叶清流

vabs 发表于 2014-2-26 08:35
楼上，是检验胰酶吗？@绿叶清流

药典上说的是：加完供试品之后，在水浴上准确反应10分钟，同时滴加氢氧化钠使pH恒定在9.0

绿叶清流

hongwei2000 发表于 2014-2-26 11:36
你把检验方法给帖出来
才好帮你分析可能性

药典上说的是：加完供试品之后，在水浴上准确反应10分钟，同时滴加氢氧化钠使pH恒定在9.0

绿叶清流

hongwei2000 发表于 2014-2-26 11:36
你把检验方法给帖出来
才好帮你分析可能性

药典上说的是：加完供试品之后，在水浴上准确反应10分钟，同时滴加氢氧化钠使pH恒定在9.0

hongwei2000

你对比一下USP和EP
虽然方法不太一样
但可以知道应该是第一种方法
pH值是维持反应进行的一个参数
必要的话你的反应溶剂使用同一配制分别取等同量测定供试和空白

歪说歪有李

我们检验时未发现此种问题，只是检验的效价不如厂家的高，但是符合药典标准

另外，这个反应的温度控制、pH控制是关键要素。

控温精度较高，好像普通水浴不可以；另外橄榄油制乳也要认真镜检，避免试剂不均匀；pH我们是边加入边搅拌控制的（第一种方法）。

歪说歪有李

我们检验时未发现此种问题，只是检验的效价不如厂家的高，但是符合药典标准

另外，这个反应的温度控制、pH控制是关键要素。

控温精度较高，好像普通水浴不可以；另外橄榄油制乳也要认真镜检，避免试剂不均匀；pH我们是边加入边搅拌控制的（第一种方法）。

别的我的检验人员未发现空白高的情况，我们空白大概在3.X

@咕咕  @仲夏秋夜云  

绿叶清流

hongwei2000 发表于 2014-2-26 13:32
你对比一下USP和EP
虽然方法不太一样
但可以知道应该是第一种方法

好的，谢谢啦！

绿叶清流

vabs 发表于 2014-2-28 10:25
我们检验时未发现此种问题，只是检验的效价不如厂家的高，但是符合药典标准

另外，这个反应的温度控制、 ...

非常感谢啦！我们公司的检验人员以前都是按照第三种方法做的，做的结果倒是挺正确的，但是我总觉得不是特别对！我自己反省了一下，觉得空白组的体积大的原因应该是供试品在水浴中煮沸，从而使酶的活性未被破坏，但是那也不可能会比供试品组的大。