有谁知道头孢呋辛酯胶囊沙门的限度检验方法不？

思行者

在实际过程中，按照药典直接法，抑菌性太强了，加进去的沙门都检不出，也尝试了培养基稀释加酶，效果不好，第一开始粗滤，再做，也是过不下的，求点拨，谢谢了！

思行者

还有地尼胶囊的

咕咕

这个太专业了，得做过的人来分享下经验。

静夜思雨

多稀释一步看看哦。

静夜思雨

或者两法结合。

yuansoul

[摘要] 按照《中国药典》2005年版二部微生物限度检查方法进行验证试验,建立头孢卡品酯胶囊微生物限度检查方法。该药的细菌计数方法为薄膜过滤法;霉菌及酵母菌计数方法为平皿法;控制菌(大肠埃希菌)计数方法为薄膜过滤法和培养基稀释法。

    [关键词] 头孢卡品酯胶囊; 薄膜过滤法; 平皿法; 培养基稀释法

    [中图分类号] R978.1+1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2010)13-86-02

    头孢卡品酯胶囊是由头孢卡品酯和辅料组成的胶囊剂,为第四代口服头孢类抗生素。具有广谱抗菌活性,对耐青霉素(含中等程度耐药)的肺炎链球菌的活性很强,对很多耐抗生素的病原菌均有良好疗效。

    由于该药具有很强的抗菌作用,需要通过验证来建立它的微生物限度检查方法。

    本试验用2005年版中国药典规定的3株细菌(大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)、2株真菌(黑曲霉、白色念珠菌)[1]对三批头孢卡品酯胶囊进行了微生物限度检查法的验证试验,以确认所采用的方法是否适合于该药品的细菌、霉菌、酵母菌数的测定和控制菌检查及检查药品本身污染微生物的状况,结果报道如下。

    1 实验材料

    1.1 仪器

    HTY-2000A型集菌仪、泵管FPY330型(批号20080622)、HTY-K型培养器专用震荡仪、HTY反复使用集菌培养器(杭州泰林生物技术设备有限公司);LRH-250生化培养箱(上海索普仪器有限公司)。

    1.2 试药

    营养琼脂培养基(批号071129)、营养肉汤培养基(批号071119)、玫瑰红钠琼脂培养基(批号071217)、BL培养基(批号071210)、MUG培养基(批号080716)北京三药科技开发公司;靛基质试验欧-波试液(批号080730)江苏宜兴永信生物有限公司;0.9%无菌氯化钠溶液、pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液(扬子江药业集团有限公司输液车间配制)。

    1.3 菌种

    大肠埃希菌[CMCC(B)44102];金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003];枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501];黑曲霉[CMCC(F)98003];白色念珠菌[CMCC(F)98001]均由中国药品生物制品检定所提供。

    2 方法

    2.1 菌液制备[2]

    分别接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中在30～35℃中培养18～24h;接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中在23～28℃中培养24～48h,上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液稀释成含菌数为(50～100)cfu/mL的菌悬液;另外接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基中,在23～28℃中培养5d,加入5mL 0.9%无菌氯化钠溶液,将孢子洗脱后,用0.9%无菌氯化钠溶液稀释成含孢子数为(50～100)cfu/mL的菌悬液,备用。

    2.2 供试液制备

    供试液:取供试品5g,加入已灭菌的吐温80约5mL,慢慢加入45℃的pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100mL,边加边搅拌,保温振摇使混匀,静置后的上清液作为1∶20的供试液。

    稀释剂对照液:分别取灭菌的吐温80约5mL,分别加入约5000～10000CFU的菌悬液,慢慢加入45℃的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100mL,边加边搅拌,使混匀,作为含菌量(50～100)cfu/mL的稀释剂对照液。

    各试验菌分别制备一份 ......

思行者

yuansoul 发表于 2013-6-8 10:45
[摘要] 按照《中国药典》2005年版二部微生物限度检查方法进行验证试验,建立头孢卡品酯胶囊微生物限度检查方 ...

要求的是检控制菌沙门啊。沙门要求的是检10G，所以检验方法就不怎么好弄

yuansoul

思行者 发表于 2013-6-8 11:33
要求的是检控制菌沙门啊。沙门要求的是检10G，所以检验方法就不怎么好弄

问地方药检所或者中检院吧

思行者

yuansoul 发表于 2013-6-8 11:35
问地方药检所或者中检院吧

问了 他们不检这个

yuansoul

思行者 发表于 2013-6-8 11:43
问了 他们不检这个

完了，死胡同了

hongwei2000

沙门检验样品量非常大，你可以考虑综合的方法：1）加大稀释剂的量，确保主药能够全部溶解并降低抑菌性；2）加酶破坏内酰胺环；3）用薄膜过滤的方法除去主药；4）使用卵磷脂等作为稀释剂以降低抑菌性。

思行者

hongwei2000 发表于 2013-6-8 15:15
沙门检验样品量非常大，你可以考虑综合的方法：1）加大稀释剂的量，确保主药能够全部溶解并降低抑菌性；2） ...

恩，谢谢。