动态显色法内毒素检测

天边123 · 发表于 2023-8-22 09:09:32

欢迎您注册蒲公英

您需要登录才可以下载或查看，没有帐号？立即注册

x

求解答：
内毒素检测，在做干扰实验时，供试品在2小时内未达到预设吸光度值，怎么算其内毒素的浓度值，以及后续的回收率呢？

Mr●小肚子♂ · 发表于 2023-8-22 09:28:05

预设是不是太高了？你的标准曲线最低点应该也用不到这么长时间吧，如果超出标曲范围，内毒素浓度计算肯定是不准确的，按照标曲计算只是个外推值，

回收率计算看你怎么规定的，超出标曲范围可以当0计算，可以用外推值，也可以用标曲最低点，这个没有明确要求，个人建议外推

翠ck01g38i · 发表于 2023-8-22 09:49:23

我想知道这个内毒素我吸光度值有了，怎么做曲线啊？不懂。。。求赐教

天边123 · 发表于 2023-8-22 11:20:11

Mr●小肚子♂ 发表于 2023-8-22 09:28
预设是不是太高了？你的标准曲线最低点应该也用不到这么长时间吧，如果超出标曲范围，内毒素浓度计算肯定是 ...

您好，我们预设值为0.4，查资料建议0.02-0.5，鲎试剂说明书建议0.02-0.1，但是阴性对照检测已达0.07，显然0.02-0.1不合适，检测时间目前规定的是60min，供试品为0.15左右，所以感觉降低预设值，供试品也会有未达预设值的情况；所以想咨询您一下，外推值怎么计算呢？求赐教，万分感谢

刘小懒、 · 发表于 2023-8-22 15:10:40

天边123 发表于 2023-08-22 11:20
您好，我们预设值为0.4，查资料建议0.02-0.5，鲎试剂说明书建议0.02-0.1，但是阴性对照检测已达0.07，显然0.02-0.1不合适，检测时间目前规定的是60min，供试品为0.15左右，所以感觉降低预设值，供试品也会有未达预设值的情况；所以想咨询您一下，外推值怎么计算呢？求赐教，万分感谢

虽然标曲是你用3个点以上的值去做的，但是不管是直线还是曲线都是可以延伸的，外推值就是没有在标曲那几个点以内的，就相当于延伸了标曲，让那个点落在这个曲线上，这么说你能明白不？

来自安卓APP客户端

天边123 · 发表于 2023-8-22 15:29:21

刘小懒、发表于 2023-8-22 15:10
虽然标曲是你用3个点以上的值去做的，但是不管是直线还是曲线都是可以延伸的，外推值就是没有在标曲那几 ...

我明白你的意思，现在是我供试品的吸光度值未达到我预设的值（吸光度），因此我就获得不了时间（Y值），我的标曲是内毒素的浓度（X值）和时间的关系（Y值），我没有时间这个数据去算浓度，，，

Mr●小肚子♂ · 发表于 2023-8-22 20:49:32

天边123 发表于 2023-8-22 15:29
我明白你的意思，现在是我供试品的吸光度值未达到我预设的值（吸光度），因此我就获得不了时间（Y值）， ...

你的阴性对照是0.15，如果供试品没得到值我是不是可以理解为，样品中内毒素含量可能比阴性对照还要低？

那既然这样你可以得到样品中内毒素浓度小于**的一个值，比如小于标准曲线最低点，没必要非要得到具体的值，回收率=（样品阳性-样品）/标曲中点，样品的值没有得到，也没有得到外推值，可以考虑按0处理

Mr●小肚子♂ · 发表于 2023-8-22 20:52:46

Mr●小肚子♂ 发表于 2023-8-22 20:49
你的阴性对照是0.15，如果供试品没得到值我是不是可以理解为，样品中内毒素含量可能比阴性对照还要低？
...

又或者你的阴性对照使用的内毒素检查用水，应该是有限度的，比如安度斯的一般标注<0.003或者你们自己有内控的标准，也可以按这个来定，不过我觉得你的方法可能有点问题，是不是稀释倍数太大了。。

天边123 · 发表于 2023-8-23 09:46:20

Mr●小肚子♂ 发表于 2023-8-22 20:52
又或者你的阴性对照使用的内毒素检查用水，应该是有限度的，比如安度斯的一般标注

考察了不同的稀释倍数得到的结果都差不多，应该和样品稀释倍数没有关系，最后非常感谢您热心的帮我们解答问题，为我们解决问题提供了思路，非常感谢

张寅 · 发表于 2023-8-23 09:50:43

1.您知道您的供试品的内毒素是多少吗？比如用凝胶法是否测过，是不是内毒素太低了？
如果内毒素太低了，我们会用小于标曲的最小值来报，加标回收，供试品没有读数就用0来算呗。
2.会不会您产品的buffer，其实对这个方法有干扰，导致检测不出？
可以试试只用buffer+标试试看，回收率是否符合规定。

天边123 · 发表于 2023-8-23 16:11:59

张寅发表于 2023-8-23 09:50
1.您知道您的供试品的内毒素是多少吗？比如用凝胶法是否测过，是不是内毒素太低了？
如果内毒素太低了， ...

应该是供试品中的内毒素太低了，我们做的实验回收率满足药典要求，应该buffer 的干扰不影响检测

Mr●小肚子♂ · 发表于 2023-8-23 21:31:59

天边123 发表于 2023-8-23 16:11
应该是供试品中的内毒素太低了，我们做的实验回收率满足药典要求，应该buffer 的干扰不影响检测

你要考虑一个关键的问题，你的阴性对照能达限，但是供试品不达限，这就不合理，供试品即便是没有内毒素的，达限时间也应该和阴性对照平行，如果不平行且差距很大，说明什么呢？有干扰~

天边123 · 发表于 2023-8-25 09:44:34

Mr●小肚子♂ 发表于 2023-8-23 21:31
你要考虑一个关键的问题，你的阴性对照能达限，但是供试品不达限，这就不合理，供试品即便是没有内毒素的 ...

你可能看错了，我们实验结果，阴性对照是0.07，供试品是0.15；阴性对照是小于供试品的