关于微生物限度检查薄膜过滤法稀释级别选择的问题

蒲公英668822848

若在使用薄膜过滤法时，根据限度标准，应制定1:10、1:100、1：1000三个稀释级别，但由于每一个稀释级别的所需冲洗量均为1000，在进行检测时是否可以仅选择1：1000，这个稀释级别进行过滤，培养

18913555243

你要这样想，每步稀释，其实准确性就会低一些。你直接稀释到1：1000，这个准确性就更低了？为了少冲洗，你要先做验证，保证计数准确性没有问题，才能直接稀释。

清晨的太阳

进来占个楼

MeekChan

做个验证先

蒲公英668822848

18913555243 发表于 2025-5-8 12:55
你要这样想，每步稀释，其实准确性就会低一些。你直接稀释到1：1000，这个准确性就更低了？为了少冲洗，你 ...

我们方法学验证是选取的最低稀释级别做的，就是1:10这个级别，是通过的，但是实际检测时，我们根据限度标准（2000、200）需氧菌需要做1:10、1:100、1:1000，霉菌酵母菌需要做1：10、1：100，我们现在为了减少缓冲液的用量，想需氧菌直接选用1:1000的级别进行检测培养，霉菌酵母菌直接选用1:100的级别做，这样的话，是还要在做分别做一个1：1000、1:100稀释级别的方法学？

蒲公英664367343

路过，学习一下

举个栗子，别吃

个人看法，首先要确定你说的前提，按我的理解，“稀释级别”，就是意味着你的样品浓度是1：10、1：100、1：1000的，是呈梯度的，如果按这个理解，那么就不可以直接选择1：1000的，因为1：1000的结果是以10的3次方，而1：10是1次方，如果样品本身微生物不多，3次方的数据结果显然没有1一次方可靠，但是按你后文的描述，这个并不是所谓的稀释级别，而是加入到了相对的稀释液进行全检，那么本质上样品量是不变的，经过确认评估就没什么问题，不过个人也不建议，个人认为冲洗主要还是把可能残留的微生物从过滤器内壁上冲洗到膜上，一般来说冲洗液都是不带样品的稀释液，你直接用1:1000去做，应该也只算是供试品溶液的过滤，可能不太起到冲洗的目的

18913555243

蒲公英668822848 发表于 2025-5-8 15:21
我们方法学验证是选取的最低稀释级别做的，就是1:10这个级别，是通过的，但是实际检测时，我们根据限度标 ...

方法学验证的时候应该是全都要做的，你只有全部验证到，才能说明检验方法没问题啊。有一点，我不太明白，为何你两种培养基对应的样品量还不一样？原则上，你的样品应该是等分培养的。就像我们做水的微生物，取100mL的样品，你一定是两个平板各50mL滤过的。

蒲公英668822848

18913555243 发表于 2025-5-8 17:32
方法学验证的时候应该是全都要做的，你只有全部验证到，才能说明检验方法没问题啊。有一点，我不太明白， ...

需氧菌；霉菌酵母菌取样量是一样的，只是根据限度标准，做的稀释级别不一样而已，需氧菌的限度标准是2000，霉菌酵母的标准是200，那么需氧菌就需要做到1:1000的级别，霉菌酵母菌仅需做到1:100就可以