液相同一小瓶峰面积差异大

qqbb99

同一小瓶，第一针峰面积20，第二针2000多，再进2针都是2000多，查看压力，第一针进样瞬间压力比其他针小10bar，进样量是10ul，全封闭的小瓶，但溶液只倒了2/3，可能的原因是什么啊？

歪说歪有李

换预开口瓶，控制样品室温度

胜利者

样品瓶有水？

greatwolf

有可能进样针的问题，有可能小瓶垫片的问题，当你把没有预开口的垫片卡太紧，针要扎进去就困难了。

白天的星星v2r

进样小瓶不能全封闭，抽完第一针，会形成负压；样品好溶吗？从峰面积来看样品不均一，再拿出来超声看看（前提超声不破坏样品）；再10bar的压力看初始进样系统有问题，如果后面一直平稳，那还是从样品溶液均一性找找。

我是一个小秘密

小瓶盖子拧太紧了，气压问题？

ALPACA

1. **进样问题**
   - **进样针堵塞或部分堵塞**：第一针可能由于进样针存在堵塞情况，导致实际进入色谱系统的样品量很少，所以峰面积只有20。而在后续进样过程中，堵塞物可能被冲开，使得正常进样量（10μl）进入系统，从而峰面积达到2000多。进样针长时间使用或者样品中有微小颗粒等杂质都可能导致堵塞。
   - **进样针位置差异**：第一针进样时，进样针的位置可能没有正确插入样品溶液中，或者没有完全吸取到足够的样品。例如，进样针可能只接触到了小瓶上部的少量样品或者空气，导致吸取的样品量极少。而后续进样时进样针位置正确，吸取了正常量的样品。
2. **样品瓶问题**
   - **样品瓶内压力变化**：虽然是全封闭小瓶，但溶液只倒了2/3，第一针进样时可能由于瓶内空间相对较大，进样瞬间压力变化与后几针不同。第一针进样时较低的压力（小10bar）可能影响了样品的吸取和传输过程，使得进入色谱系统的样品量不足。随着进样次数增加，瓶内压力逐渐稳定在一个相对较高的值，保证了后续正常的样品进样量。
3. **色谱系统问题**
   - **进样口吸附或残留**：进样口处可能存在对样品的吸附现象。第一针进样时，进样口吸附了大部分样品，导致真正进入色谱柱进行分离并被检测到的样品量很少。在后续进样过程中，进样口吸附位点可能已经饱和，或者之前吸附的样品逐渐解吸，使得正常量的样品能够顺利通过进样口进入色谱柱，从而峰面积增大。
   - **色谱柱前端问题**：色谱柱前端可能存在部分堵塞或者死体积等情况。第一针进样时，样品可能在色谱柱前端没有正常保留和分离，部分样品损失，导致峰面积小。后续进样过程中，由于压力等因素的变化，样品能够正常在色谱柱中保留和分离，使得峰面积增大。