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本帖最后由 无锡耐思NEST 于 2023-4-19 14:53 编辑
刚接触细胞培养的小白，生物实验技术理论知识一堆，但真正到操作环节手忙脚乱，一堆“黑话”一头雾水，常常不知从哪里下手。 耐思将系统介绍细胞培养知识，带领细胞小白从0到1，成为大神！ 超级干货持续更新，细胞房新手er冲吖！
01为什么要进行细胞体外培养现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术，而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系。 医药领域（基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多是通过细胞培养来实现）、基因工程（乙肝疫苗很多是以 CHO 细胞作为载体）、细胞工程（杂交瘤单克隆抗体，完全是通过细胞培养来实现），既使是现在飞速发展的基因工程抗体也离不开细胞培养；正在倍受重视的基因治疗、体细胞治疗也要经过细胞培养过程才能实现，发酵工程和酶工程有的也与细胞培养密切相关。 总之，细胞培养在整个生物技术产业的发展中起到了很关键的核心作用。
02细胞培养的基本概念细胞培养：将活细胞(尤其是分散的细胞) 在体外进行培养的方法成为细胞体外培养。狭义的细胞体外培养主要是指分离（散）细胞培养，广义的细胞体外培养还包括单（个）细胞培养又称克隆（clone），是指单个细胞通过有丝分裂形成的细胞群体。一个细胞克隆中的所有细胞均来源于同一个祖先细胞。 原代细胞：初次培养。即培养物一经接种到培养皿中就不再分割，任其生长繁殖而不更换生长器皿。 传代培养：随着培养时间的延长、细胞不断分裂繁殖，细胞之间相互接触会发生接触性抑制，生长速度逐渐减慢甚至停止。培养器皿中营养物逐渐不足，代谢产物不断累积，不利于细胞继续生长。在这种情况下，都需要将培养物分割成小的部分，重新接到培养器皿中进行再培养。 细胞系：原代细胞培养物经首次传代培养后所繁殖的细胞群体。狭义的是指可连续传代的细胞，广义是指可传代的细胞。正常细胞通常只能分裂有限的次数，随后就会丧失增殖的能力，这是一个由遗传决定的事件，被称为衰老。这种细胞系被称为有限细胞系；一些细胞系会通过被称为转化的过程变为永生性细胞系，这一过程可自然发生，也可经化学或病毒诱导发生。有限细胞系发生转化获得无限分裂能力后，就成为连续细胞系。
03细胞培养的环境细胞培养实验室的主要要求是需要维持细胞培养工作区域处于无菌状态。获得无菌条件的最为简单、经济的方式就是使用细胞培养超净台。 细胞培养超净台大小应足够一人使用，内部和外部均易于清洁，具有充足的照明，使用舒适，不会导致体位不便。保持细胞培养超净台内工作空间整洁有序，将所有物品置于直视范围内。向放入细胞培养超净台内的所有物品喷洒 70% 乙醇，擦拭清洁，进行消毒。 细胞培养超净台内物品的摆放一般遵循以下右手使用习惯，并可根据特殊实验中增加的物品进行相应的改动。  • 在通风橱中部开阔区域放置细胞培养耗材 • 移液器械及耗材置于右前方易于取用的地方 • 试剂和培养基置于右后方，便于吸取 • 试管架置于中后部，用于固定其他试剂 • 小型容器置于左后部，用于盛放废液 说在最后 养细胞是细胞实验的基础 希望大家能快速掌握这门技术！ 耐思陪你共同成长！
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发表于 2023-4-19 14:52:32
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