高效液相色谱仪

晴露

问题：目标峰前总会出一个很宽的倒峰，不知是何原因流动相：乙腈和水，乙腈是色谱级的，水是蒸馏水，目前分别以这两个进样，3分钟左右都会出一个倒峰。
洗脱方法：等度、梯度都试过，比例也调整好多次，峰型都一样
走过一针空针（有进样的动作但是不进任何样品），没有出现倒峰的现象
综上，有大神分析一下是什么原因吗？

lik-

先把流动相换个品牌试试？已腈和水都换换

lik-

可能性：1、水 乙腈，水换下或者买屈臣氏，乙腈换个牌子；2、系统可能存在气泡，流动相配置时延长下排气泡时间，HPLC排空时间也长一点，包括后续的平衡时间。

jchaoli

先排查是不是死体积吧。把主峰出锋时间往后调，看倒峰能不能脱离出来。
再换根柱子试试，有时候奇怪的问题换了柱子就好了。

晴露

jchaoli 发表于 2022-9-1 16:57
先排查是不是死体积吧。把主峰出锋时间往后调，看倒峰能不能脱离出来。
再换根柱子试试，有时候奇怪的问题 ...

奇怪的是，改变有机相比例，目标峰保留时间有改变，但是那个倒峰依旧是从3min左右开始的，一直延续到目标峰前。刚刚换了根柱子，发现还是同样的峰型。

晴露

lik- 发表于 2022-9-1 16:51
可能性：1、水 乙腈，水换下或者买屈臣氏，乙腈换个牌子；2、系统可能存在气泡，流动相配置时延长下排气泡 ...

今天将乙腈换成甲醇，还是同样的峰型，水就是用的屈臣氏。我后面再试试其他品牌的乙腈和水，谢谢~

尘み缘

这个是样品？对照呢有没有？另外走空针你应该进一个空白试剂看看~

Tay

应该进一针溶剂看看。 另外保留时间不变的话，估计是在柱子中不保留的组分，大概率是溶剂的问题

晴露

fcying 发表于 2022-9-1 17:29
这个是样品？对照呢有没有？另外走空针你应该进一个空白试剂看看~

这就是用的标准品，空白试剂跑过，没有那么宽的倒峰

晴露

Tay 发表于 2022-9-2 08:19
应该进一针溶剂看看。 另外保留时间不变的话，估计是在柱子中不保留的组分，大概率是溶剂的问题

溶剂就是用的流动相，请问柱子中不保留的成分是什么意思呢？我跑出来目标峰有随着浓度的增加而变高

lik-

用流动相溶解样品的话，还有倒峰，那就考虑是不是试剂的问题了。有没有换仪器？排除一下仪器的原因？

晴露

lik- 发表于 2022-9-2 09:14
用流动相溶解样品的话，还有倒峰，那就考虑是不是试剂的问题了。有没有换仪器？排除一下仪器的原因？

那我后面考虑一下试剂和仪器问题，看能不能解决，谢谢你~

lik-

找到原因了吗