1106中耐胆盐革兰阴性菌定量试验稀释剂问题

zhangxiefeng11

药典原文：

供试液制备和预培养    取供试品，用胰酪大豆胨液体培养基溶解或稀释制成1：10供试液，混匀，在20~25℃培养，培养时间应使供试品中的细菌充分恢复但不增殖（约2小时）。

       定性试验

       除另有规定外，取相当于1g或1ml供试品的上述预培养物接种至适宜体积（经方法适用性试验确定）肠道菌增菌液体培养基中，30~35℃培养24~48小时后，划线接种于紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上，30~35℃培养18~24小时。如果平板上无菌落生长，判供试品未检出耐胆盐革兰阴性菌。

       定量试验

       选择和分离培养    取相当于0.1g、0.01g和0.001g（或0.1ml、0.01ml和0.001ml）供试品的预培养物或其稀释液分别接种至适宜体积（经方法适用性试验确定）肠道菌增菌液体培养基中，30~35℃培养24~48小时。上述每一培养物分别划线接种于紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上，30~35℃培养18~24小时。

       结果判断    若紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上有菌落生长，则对应培养管为阳性，否则为阴性。根据各培养管检查结果，从表2查1g或1ml供试品含有耐胆盐革兰阴性菌的可能菌数。

1、请问0.1g、0.01g、0.001g怎么取用的，有没有不稀释还能准确取“预培养2小时后的1:10的供试液”的方法？
2、若释释后再移取相应数量，那么请问此处稀释剂用胰酪大豆胨液体培养基还是PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液？

个人理解此处应用胰酪大豆胨液体培养基，因为1:10预培养时也有这个。但有些培训PPT用的是PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，如下图。还是只要 经方法适用性试验确定 两种任何一种均可行？因为以前微生物检测没具体接触过，所以请各位大神不吝赐教！


补充内容 (2021-1-13 08:17):
做微生物检测的请赐教！

zhangxiefeng11

大神们把自已实际做的情况分享一下也可以的，谢谢！

乐道12

感觉你的这个就挺详细了，用胰酪大豆胨液体培养基溶解或稀释制成1：10供试液，两个都可以